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人促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒定量檢測性能

2018-6-1  閱讀(1827)

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人促甲狀腺素TSH酶聯(lián)免疫分析(ELISA)

試劑盒使用說明書

Cat.No. RJ-12071

本試劑僅供研究使用       目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中促甲狀腺素(TSH)的含量,。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本人促甲狀腺素(TSH)水平,。用純化的人促甲狀腺素(TSH)捕獲抗體包被微孔板,,制成固相體,,往包被的微孔中依次加入人促甲狀腺素(TSH),,再與HRP標記的檢測抗體結合,,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人促甲狀腺素(TSH)呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),,通過標準曲線計算樣品人促甲狀腺素(TSH)含量

 

試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1份

1份

 

封板膜

2片

2片

 

密封袋

1個

1個

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標準品

0.3ml×6管

0.3ml×6管

2-8℃保存

酶標試劑

5 ml×1瓶

10 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

20×濃縮洗滌液

15ml×1瓶

25ml×1瓶

2-8℃保存

注:標準品濃度依次為:12,、6,、3、1.5,、0.75,、0 mU/L.

注意事項:

  • 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存,。
  • 濃洗滌液可能會有結晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果,。
  • 各步加樣均應使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。
  • 請每次測定的同時做標準曲線,,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
  • 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
  • 底物請避光保存,。
  • 嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
  • 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
  • 本試劑不同批號組分不得混用,。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準,。

 

 

計算

以標準物的濃度為橫坐標,,OD值為縱坐標,    

在坐標紙上繪出標準曲線,,根據(jù)樣品的OD      

值由標準曲線查出相應的濃度,;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標      

準曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值      

代入方程式,,計算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),,即為樣品的實際濃度,。                  

 

                                              

 

(此圖僅供參考)

 

 

 

試劑盒性能:

1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上。

2.批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應分別小于10%和15% ,。

 

檢測范圍:                                              

0.375 mU/L - 12 mU/L

 

靈敏度:                                              

zui低檢測濃度小于0.1 mU/L

 

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存: 2-8,。

2.有效期: 6個月

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