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人促甲狀腺素(TSH)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
試劑盒使用說明書
Cat.No. RJ-12071
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中促甲狀腺素(TSH)的含量,。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人促甲狀腺素(TSH)水平,。用純化的人促甲狀腺素(TSH)捕獲抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被的微孔中依次加入人促甲狀腺素(TSH),,再與HRP標記的檢測抗體結合,,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人促甲狀腺素(TSH)呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),,通過標準曲線計算樣品中人促甲狀腺素(TSH)含量。
試劑盒組成:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 |
|
封板膜 | 2片 | 2片 |
|
密封袋 | 1個 | 1個 |
|
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20×濃縮洗滌液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
注:標準品濃度依次為:12,、6,、3、1.5,、0.75,、0 mU/L.
注意事項:
- 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存,。
- 濃洗滌液可能會有結晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果,。
- 各步加樣均應使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。
- 請每次測定的同時做標準曲線,,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
- 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
- 底物請避光保存,。
- 嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
- 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
- 本試劑不同批號組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準,。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,,OD值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,,根據(jù)樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度,;再乘以稀釋
倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值
代入方程式,,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數(shù),,即為樣品的實際濃度,。
(此圖僅供參考)
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應分別小于10%和15% ,。
檢測范圍:
0.375 mU/L - 12 mU/L
靈敏度:
zui低檢測濃度小于0.1 mU/L
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存: 2-8℃,。
2.有效期: 6個月