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制備好免疫膠體金后,，還需要將其稀釋到一定濃度,，并吸附于特殊的惰性介質(zhì)中才能夠zui終制成產(chǎn)品。一般來說,，特殊的介質(zhì)常用的是玻璃纖維或無紡布,。玻璃纖維和無紡布本身一般是疏水的，膠體金產(chǎn)業(yè)一般采用表面活性劑預(yù)處理過的玻璃纖維或無紡布,，通常配方為1%Tween20+適量PVA,。介質(zhì)處理完成后，免疫膠體金稀釋液的配伍才是zui關(guān)鍵的?，F(xiàn)總結(jié)原則如下：
1,、合適的離子種類和強(qiáng)度
免疫膠體金畢竟是含有生物活性分子，應(yīng)用時還要面對千差萬別的樣品,，原則上需要稀釋在合適PH的緩沖液中,。經(jīng)驗值是6-9。在這個范圍內(nèi)可選的緩沖主要有Tris和PB,，也不排除其他種類緩沖適用的可能,。當(dāng)使用的緩沖離子強(qiáng)度過大如超過0.2M時，有可能造成釋放,、層析不好或檢測結(jié)果異常,。離子的種類也因為免疫膠體金的生物分子不同而有諸多限制，例如鈣調(diào)蛋白可能與Ca2+離子有關(guān)系,。而鹵素離子強(qiáng)度對膠體金穩(wěn)定性似乎有特殊的破壞作用,，教科書式的NaCl調(diào)試zui適標(biāo)記條件就是例子。
2,、大分子物質(zhì)作為膠體金干燥后均勻散布的骨架
這個其實是凍干工藝的理論基礎(chǔ),，適用于膠體金干燥工藝,，對凍干有研究的應(yīng)該對這個工藝感覺很小兒科。抽真空是一個熱力學(xué)吸熱過程,，實驗表明免疫膠體金的真空干燥是一個先冷凍再升華的過程,，十分類似凍干。無紡布材料的工藝由于干燥過程快,，多數(shù)采用烤干的工藝,，但是大分子的骨架作用仍然是對產(chǎn)品的釋放速度和比率有很大幫助。常用大分子物質(zhì)如PEG4000,、PEG20000,、PVP等，建議盡量從中選擇一種添加使用,。
3,、小分子物質(zhì)對蛋白活性保護(hù)
蛋白儲存常用的甘油、蔗糖,、海藻糖,、各類低聚糖等，對產(chǎn)品的儲存穩(wěn)定性有幫助,，忽略這部分物質(zhì)的添加可能限制產(chǎn)品從實驗室走生產(chǎn)和市場,。這類物質(zhì)也是凍干細(xì)胞常用的。
4,、惰性蛋白
這類物質(zhì)的功能就更復(fù)雜,。首先還是保護(hù)目的蛋白的活性，也維持膠體金的膠體穩(wěn)定,，它們是消除非特異性的封閉物質(zhì),，也起著有分散膠體金顆粒的骨架作用。常用有BSA,、OVA,、Casein，其他廉價蛋白似乎不太好找,，脫脂奶粉個人建議不用,，質(zhì)量太難控制了，當(dāng)然如果大家已經(jīng)在用而且效果不錯,，也沒有必要過于擔(dān)心,。
5、表面活性劑
這個東西在這個產(chǎn)業(yè)里可是萬萬不能缺少,，但是吸附材料已經(jīng)用表面活性預(yù)處理的,，也可以不拘泥于添加在免疫膠體金稀釋液里。一般情況下,，Tween20就可以了,，其實蛋白質(zhì)復(fù)性常用的非離子型表面活性劑都可以一試,，前一段時間某位高人說TritonX-100等可能會干擾蛋白的N末端建議不要用，我聽了不是很理解,，在這里請高人指點,。
6、其它
產(chǎn)品種類千差萬別,，以上5類物質(zhì)外，傳說還有一些可以“提高產(chǎn)品敏感性”,、“提高產(chǎn)品檢測線性范圍”,、“強(qiáng)制轉(zhuǎn)換**檢測*cut-off范圍”、“HAMA效應(yīng)抑制”和”線條規(guī)定時間深度變化終止“等神秘添加物,，從理論上不排除存在的可能,，但是往往一種“神物”有效的范圍十分狹窄，也就是說一種“神物”可能只適用于一個公司一種抗體的一個產(chǎn)品,，換個環(huán)境就無效了,。尋找神物的工作往往是研發(fā)型的大公司的資深技術(shù)人員，而對神物的控制往往也是如同企業(yè)一級機(jī)密,。
