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當(dāng)前位置：北京百奧創(chuàng)新科技有限公司>>產(chǎn)品>>培養(yǎng)基>> PRS-GCM-3DPRECEDO胃癌3D類器官培養(yǎng)基
產(chǎn)品名稱：PRECEDO胃癌3D類器官培養(yǎng)基（Gastric Carcinoma Organoid Medium）
產(chǎn)品說明：PRECEDO胃癌3D類器官培養(yǎng)基（Gastric Carcinoma Organoid Medium）是一種為促進(jìn)人源胃癌類器官體外形成和擴(kuò)增而開發(fā)的培養(yǎng)基,。它是一種無菌的液體混合系統(tǒng),，含有必需和非必需的氨基酸、維生素,、有機(jī)和無機(jī)化合物,、生長因子、微量礦物質(zhì)等,。該培養(yǎng)基的*配方可以提供一個(gè)理想人源胃癌類器官體外培養(yǎng)環(huán)境,，選擇性地促進(jìn)體外人源胃癌類器官的生長。
產(chǎn)品優(yōu)勢：
(1) 培養(yǎng)成功率高
(2) 體外持續(xù)擴(kuò)增
(3) 保持腫瘤特征
(4) 藥敏結(jié)果與臨床數(shù)據(jù)接近
使用說明：
?實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
（1）15mL無菌離心管,、1.5mL離心管,、24孔細(xì)胞培養(yǎng)板,、移液器、移液管,、無菌槍頭等表面消毒后放入生物安全柜中紫外照射30min,。
（2）提前30min從4℃冰箱取出胃癌類器官培養(yǎng)基平衡至室溫，提前1h從-20℃冰箱取出所需體積的基質(zhì)膠冰上融化,。
?胃癌類器官培養(yǎng)
（1）將獲取的胃癌原代細(xì)胞懸液計(jì)數(shù),，根據(jù)計(jì)算好的體積吸取細(xì)胞懸液加入預(yù)冷的1.5 mL離心管中。
（2）補(bǔ)齊預(yù)冷的培養(yǎng)基至所需體積,，將預(yù)冷后的細(xì)胞懸液加入等體積的基質(zhì)膠中輕輕混勻（全程冰上操作）,，使得胃癌原代細(xì)胞終濃度為5×106個(gè)細(xì)胞/毫升。
（3）然后將細(xì)胞與基質(zhì)膠的混合液按照50μL/孔呈半球形點(diǎn)膠于24孔板,。
（4）將培養(yǎng)板放入5%CO2 37 ℃培養(yǎng)箱中30min,，待基質(zhì)膠*凝固。
（5）沿孔壁每孔緩慢加入500μL預(yù)先恢復(fù)至室溫的類器官培養(yǎng)基,，置5%CO2 37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng),。
（6）3天后鏡下觀察類器官形成情況，粒徑大于30~50μm即認(rèn)為類器官已經(jīng)形成,，每3天更換一次培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),，持續(xù)觀察類器官大小，鏡下觀察大部分類器官大小均大于30~50μm且大小不再增大即可收集類器官進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),。
?胃癌類器官收集
（1）棄培養(yǎng)基,，每孔加入200μL基質(zhì)膠解離試劑，室溫放置1min,。
（2）輕輕吹打混勻，收集至15mL離心管中,，50rpm恒溫震蕩解離10-20min,，解離之后1500rpm離心3 min，輕輕吸去上清,，待用,。
?胃癌類器官傳代
（1）收集的類器官，加入適量的消化酶,，37℃,，200rpm消化（具體時(shí)間根據(jù)類器官大小和數(shù)量決定，以肉眼可見顆粒明顯減小一半為準(zhǔn),，可中間取消化的類器官顯微鏡觀察,，類器官消化至3~10個(gè)細(xì)胞集合體理想）。
（2）消化*后1500rpm離心3min,，棄上清,，使用清洗液重懸后1500rpm離心3min,。
（3）加入預(yù)冷的胃癌類器官培養(yǎng)基進(jìn)行重懸，計(jì)數(shù),，按照培養(yǎng)步驟操作繼續(xù)培養(yǎng),。
注意事項(xiàng)：
1.本產(chǎn)品在使用前需平衡至室溫。
2.樣本需為腫瘤組織,，且腫瘤細(xì)胞比例越高（>50%）,，類器官培養(yǎng)成功率越高;
3.使用產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染,。
4.為保持本產(chǎn)品的愚佳使用效果,，不宣將其過夜放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。5.類器官培養(yǎng)過程要輕柔,，避免基質(zhì)膠凝固后散膠,。
6.請于保質(zhì)期內(nèi)使用本產(chǎn)品，超出保質(zhì)期,，必須放棄使用,。
7.本產(chǎn)品僅用于科研用途，不能用于體外診斷,。
