Elabscience總鐵結(jié)合力(TIBC)色法測試盒適用于檢測血清樣本中總鐵結(jié)合力,。血清內(nèi)加入過量鐵,，使血清中運鐵蛋白全部與鐵結(jié)合,，再加入鐵吸附劑將多余的鐵吸附掉，然后在酸性溶液和還原劑的作用下,，使運鐵蛋白中鐵與蛋白分離,，使血清中高鐵還原成亞鐵，后者與雙吡啶結(jié)合成粉紅色絡(luò)合物,，在一定范圍內(nèi),，鐵離子多少與色澤呈正相關(guān)，測得的鐵含量為TIBC,，由TIBC減去血清鐵值,，則稱為未飽和鐵結(jié)合力(UIBC)。

實驗關(guān)鍵點

① 沸水浴后離心,，上清液必須澄清,。

② 實驗器具一定要洗干凈,，避免鐵離子污染。

③ 粉劑比較難溶解,，需提前配制,。

操作步驟

標曲部分

① 標準孔：取 30 μL 不同濃度標準品，加入到對應(yīng)的標準孔中,。

② 向①中各孔加入 150 μL 鐵顯色劑,。

③ 在酶標儀上振板 5 s，覆膜室溫靜置 5 min,，酶標儀 520 nm 處,，測定

各孔 OD 值。

樣本部分

待測樣本上清的制備:取 50μL血清,，加入50μL的 10 mg/L 鐵標準品應(yīng)用液,，渦旋混勻3s，室溫靜置5 min,，再加入一支試劑五,，渦旋混勻3 s，室溫靜置5 min 后,，3000×g,，離心10 min，取上清待測,。

① 測定管：取 50μL待測樣本上清到1.5 mL EP 管中,。

     對照管：取 50μL雙蒸水到1.5 mL EP 管中。

② 向①中各管加入250μL 鐵顯色劑,，渦旋混勻3 s,，沸水浴5 min。

③ 流水冷卻,，10000×g,，離心10 min。(若上清渾濁,，取渾濁上清于新EP管中,，再離心一次)

④ 取 180μL上清到板孔中,，酶標儀520 nm處,，測定各孔OD值。

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