碧云天總SOD活性檢測試劑盒(S0101S)是一種基于WST-8的顯色反應(yīng),，通過比色來檢測細胞,、組織或其它樣品中SOD即超氧化物歧化酶活性的試劑盒。

目前測SOD 活性測定法有多種,，最初的核黃素法,、到 NBT(氮藍四唑)法，NBT產(chǎn)生的甲臜染料水溶性差,，易和被還原的黃嘌呤氧化酶相互作用,，抑制百分率達不到 100%等，從而使檢測的靈敏度和精確度受到影響,；本試劑盒采用的是目前穩(wěn)定性更好,、靈敏度更高的改性WST法即 WST-8法，改性的 WST 可以和黃嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase, XO)催化產(chǎn)生的超氧化物陰離子(O 2 .- )反應(yīng)產(chǎn)生水溶性的甲臜染料,，后者在 450nm 處有最大吸收,。

使用說明：

1.樣品的準備：

細胞樣品的準備：對于貼壁細胞，吸凈細胞培養(yǎng)液,，用4℃或冰浴預(yù)冷的PBS或生理鹽水洗滌一遍,，按照每100萬細胞加入100-200微升的比例加入本試劑盒提供的SOD樣品制備液，適當吹打以充分裂解細胞,；對于懸浮細胞,，600g離心5分鐘收集細胞，用4℃或冰浴預(yù)冷的PBS或生理鹽水洗滌一遍,，按照每100萬細胞加入100-200微升的比例加入SOD樣品制備液,，適當吹打，以充分裂解細胞,。4℃約12,000g離心3-5分鐘,，取上清作為待測樣品。

2.試劑盒的準備工作：

WST-8/酶工作液的配制：按照每個反應(yīng)160μl的體積配制適量的WST-8/酶工作液,。均勻混合151μl SOD檢測緩沖液,、8μl WST-8和1μl酶溶液，即可配制成160μl WST-8/酶工作液,。根據(jù)待檢測樣品(包括標準品)的數(shù)量,，配制適量的WST-8/酶工作液。配制好的WST-8/酶工作液4℃或冰浴保存,，可以在當天使用,，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

3.樣品測定：

使用96孔板設(shè)置樣品孔和各種空白對照孔,。依次加入待測樣品和其它各種溶液,。加入反應(yīng)啟動工作液后充分混勻。注意：加入反應(yīng)啟動工作液后反應(yīng)即會開始，可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應(yīng)啟動工作液的時間先后差異而導(dǎo)致的誤差,。

產(chǎn)品選購：