Elabscience MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測,。那么你知道Elabscience MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒該怎么用嗎？讓我們一起來看看吧,！

1. 準(zhǔn)備工作

本試劑盒中 MTT (5×)為濃縮液,，實驗前稀釋成 1×工作液。例如：取 100 μL MTT (5×),，加入 400 μL

MTT Diluent Buffer,，混勻后即為1×MTT 工作液。

2. 取生長狀態(tài)良好的細(xì)胞,，調(diào)整細(xì)胞密度,，按每孔100 μL 細(xì)胞懸液接種于96 孔板中，同時設(shè)空白孔（不加細(xì)胞但是加入同體積的培養(yǎng)基）,。

注：通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100 μL約含2000個細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100 μL約含5000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。

3. 根據(jù)實驗設(shè)計對細(xì)胞進行培養(yǎng)和處理。

4. 每孔加入 50 μL 的 1×MTT 工作液,。繼續(xù)孵育 1~4 h,，使 MTT 還原為甲臜,。

注：MTT孵育條件與細(xì)胞培養(yǎng)條件相同,。

5. 小心吸出上清液，每孔加入 150 μL 的 DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻,。

6. 用酶標(biāo)儀測定在 570 nm 處的吸光度。

7. 結(jié)果計算

[注]:

ODsample: 實驗孔的OD值

ODcontrol: 對照孔的OD值

ODblank: 空白孔的OD值

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