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Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測試劑盒的原理與注意事項(xiàng)
Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測試劑盒是一款靈敏度高且能快速簡便地檢測細(xì)胞凋亡的產(chǎn)品,。本試劑盒可通過流式細(xì)胞儀來進(jìn)行懸浮細(xì)胞、貼壁細(xì)胞的流式凋亡檢測,。那么你知道Elabscience一步法TUNEL流式凋亡檢測試劑盒的原理與注意事項(xiàng)是什么嗎,?讓我們一起來看看吧,!
一、檢測原理
細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí),,會(huì)激活一些特異性的DNA內(nèi)切酶,,這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。使得凋亡細(xì)胞的DNA被切割成180~200bp片段,,在瓊脂糖凝膠上通常以180~200bp 的階梯狀遷移,。細(xì)胞經(jīng)過固定破膜后,TdT酶(脫氧核糖核酸末端轉(zhuǎn)移酶)將熒光標(biāo)記的dUTP 連接到細(xì)胞斷裂DNA 暴露的 3'-OH 末端,,通過流式細(xì)胞儀檢測 dUTP偶聯(lián)物發(fā)出的熒光信號(hào),,從而來檢測晚期凋亡。
二,、保存條件
-20°C 保存,,保質(zhì)期一年。Labeling Solution 需避光保存,,Labeling Solution,、Fixation Buffer、Permeabilization Buffer需避免反復(fù)多次凍融,,建議分裝保存,。
三、注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用,。
2. 請注意安全事項(xiàng),,遵守實(shí)驗(yàn)室試劑操作規(guī)范操作。
3. 用于該試劑盒的檢測樣本zui低細(xì)胞數(shù)目不低于 5×105個(gè),。
4. 實(shí)驗(yàn)中需要重懸細(xì)胞的步驟,,用移液器輕輕吹打細(xì)胞 10~20次,吹打時(shí)請勿將槍頭中的液體wan全吹出,,避免造成細(xì)胞損傷和產(chǎn)生過多的氣泡,。
5. 離心去上清的操作要小心謹(jǐn)慎,,避免造成細(xì)胞損失。
6. Labeling Solution和TdT Enzyme 應(yīng)避免反復(fù)凍融和渦旋操作,。
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