Elabscience®自主研發(fā)的 Caspase 1 Activity Assay Kit 采用分光光度法，可用于檢測細(xì)胞、組織裂解液或其它樣本的caspase 1活性。Caspase 1 也稱 interkeukin 1β conberting enzyme (ICE)，是caspase 家族中唯yi可以剪切 IL-1β 前體蛋白或 IL-18 前體產(chǎn)生相應(yīng)成熟的細(xì)胞因子的 caspase,。那么你知道Elabscience Caspase 1活性檢測試劑盒的原理與注意事項(xiàng)嗎？讓我們一起來看看吧,！

一,、檢測原理

Elabscience Caspase 1活性檢測試劑盒是基于 caspase 1 可以催化底物Ac-YVAD-pNA 產(chǎn)生黃色的 pNA (p-nitroaniline)，pNA 在 405nm 附近有強(qiáng)吸收,，從而可以通過測定吸光度來檢測 caspase 1 的活性,。

二、保存條件

-20°C 可保存一年,。Ac-YVAD-pNA (4 mM)應(yīng)適當(dāng)分裝并避光保存,，避免反復(fù)凍融。

三,、注意事項(xiàng)

1. 所有待檢樣本都需檢測蛋白濃度，由于樣本裂解液中含有還原劑,，不適合使用 BCA 法進(jìn)行蛋白濃度測定,，推薦使用考馬斯亮藍(lán)法（Bradford 法）。

2. 建議在正式實(shí)驗(yàn)前,，選擇2~3個預(yù)期差異大的樣本進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),，若樣本吸光值超過標(biāo)準(zhǔn)曲線的測量范圍，則需稀釋樣本或者調(diào)整上樣量再進(jìn)行測定,。

3. 進(jìn)行caspase 1活性測定的樣本,，其蛋白濃度應(yīng)在1~4 mg/mL，否則會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。

4. 一次實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞數(shù)目建議不低于 1×106個,，組織樣本不低于50mg，以便達(dá)到1~4 mg/mL的蛋白濃度,。否則會影響實(shí)驗(yàn)的精準(zhǔn)度,，導(dǎo)致蛋白濃度過低，反應(yīng)體系內(nèi)活性 caspase 1過少而OD值偏低,。

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