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RNA干擾(基因沉默)
項(xiàng)目?jī)?nèi)容概述
RNA干擾(RNAi,,RNA Interference)是抵御外來病毒侵犯的一種防御機(jī)制,,廣泛應(yīng)用于功能基因組學(xué),、基因治療,、靶藥物篩選,、細(xì)胞信號(hào)通路分析、蛋白質(zhì)互作等領(lǐng)域,。具體來說,,當(dāng)dsRNA或pre-miRNA進(jìn)入細(xì)胞后,能夠被特異的核酸內(nèi)切酶(Dicer)識(shí)別并切割成為很小的片段,,這些片段在解旋酶的作用下會(huì)解鏈,。反義鏈在與體內(nèi)一些酶結(jié)合形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物(RNA-Induced Silencing Complex,RISC),,RISC與mRNA同源區(qū)進(jìn)行特異性結(jié)合,,若miRNA與mRNA的結(jié)合位點(diǎn)能夠*配對(duì),則會(huì)切割mRNA,;若miRNA與mRNA的結(jié)合位點(diǎn)不能夠*配對(duì),,則會(huì)抑制mRNA的翻譯過程。
目前實(shí)驗(yàn)中主要采用miRNA、 shRNA 和siRNA 3種RNA干擾方法,。shRNA是利用人源或鼠源的RNA聚合酶III(pol III)啟動(dòng)子,,對(duì)編碼短干擾RNA(siRNA)的DNA序列進(jìn)行轉(zhuǎn)錄來實(shí)現(xiàn)RNA干擾。轉(zhuǎn)錄后的shRNA經(jīng)加工,,參與RISC的形成,。與人工合成的siRNA相比,shRNA可以在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)有效抑制細(xì)胞內(nèi)靶基因的表達(dá),。miRNA是一類可以通過RNAi機(jī)制調(diào)節(jié)基因表達(dá)的內(nèi)源性小RNA,,人工miRNA與shRNA的設(shè)計(jì)原理基本相同,由于miRNA具有內(nèi)源性,,因此其更易產(chǎn)生有效的基因沉默,。
我們擁有一系列shRNA/miRNA表達(dá)載體以及Sponge載體,同時(shí)提供包括shRNA/miRNA設(shè)計(jì),、慢病毒包裝,、陽(yáng)性克隆鑒定、單克隆培養(yǎng),、基因沉默細(xì)胞系構(gòu)建等一系列實(shí)驗(yàn)服務(wù)內(nèi)容,。
實(shí)驗(yàn)流程
1、細(xì)胞預(yù)實(shí)驗(yàn),。
2,、慢病毒載體構(gòu)建。
3,、shRNA/miRNA功能驗(yàn)證,。
4、慢病毒包裝,。
5,、RNAi細(xì)胞系構(gòu)建。
6,、沉默效果檢測(cè),。
我們的優(yōu)勢(shì)
1、提供各種實(shí)驗(yàn)材料和儀器,,滿足項(xiàng)目課題實(shí)驗(yàn)需要,。
2、專業(yè)的操作人員,。
3,、高規(guī)格實(shí)驗(yàn)室。
4,、數(shù)據(jù)結(jié)果交付周期快,。
5,、完善的服務(wù)體系,全程跟進(jìn),,確保滿意,。
服務(wù)流程
1、提交項(xiàng)目課題相關(guān)需求和資料,。
2,、與我們的專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)討論項(xiàng)目細(xì)節(jié)。
3,、根據(jù)討論后的意見對(duì)實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行修改,。
4、雙方均滿意并達(dá)成一致,,簽訂技術(shù)服務(wù)合同,。
5、開展實(shí)驗(yàn),,按期完成合同規(guī)定的內(nèi)容,。
6、結(jié)題,,提供實(shí)驗(yàn)原始結(jié)果和分析結(jié)果,、實(shí)驗(yàn)流程、實(shí)驗(yàn)條件等等,。
咨詢與訂購(gòu)
感謝您選擇我們的服務(wù),,如果您有任何問題,請(qǐng)聯(lián)系我們,,我們將竭誠(chéng)為您解答和服務(wù),。