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詳細介紹
牛原代氣管上皮細胞專用培養(yǎng)基
產品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100mL/500mL |
貨號 | GOY-XP3292 |
牛原代氣管上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,，經過長期測試,，本產品可保持牛原代氣管上皮細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產品中已包含牛原代氣管上皮細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分,，可直接用于牛原代氣管上皮細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清（FBS） | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部,；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。
| 儀器 | 試劑 | 耗材 |
| 離心機 | 胎牛血清（FBS） | 離心管（15ml、50ml） |
| 生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細胞培養(yǎng)瓶 |
| 電動移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管（2ml,、5ml,、10ml） |
| CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基（含血清） | 1.8mL 凍存管 |
| 倒置顯微鏡 | 凍存液：90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
復蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃；
2) 準備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預熱；
3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中
復溫晃動凍存管以提高復溫速率,；
4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；
5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；
6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。
傳代 （細胞傳代建議一傳二）
1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代,。
2) 在生物安全柜內，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內的培養(yǎng)基,；
3) 向培養(yǎng)瓶內加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；
4) 向瓶內加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；
① 準備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；
② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫,。
6) 1000rpm 離心 5min,；
7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。
8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；
9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）
1）~6）參照傳代步驟
7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,，然后轉入 1.8ml 凍存管中；
8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫,；
9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉入液氮罐中保存,。
?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。
?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產品,。
?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應無菌,、無污染，使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。
?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內濕度應保持在95%左右。
?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。
?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌,、真菌等污染檢測,。
Pepsinogen C peptide 原C蛋白抗原 0.5mgPepsinogen C peptide 原C蛋白抗原
CPLX3 Protein Human 重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白
NA重組甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神經酶 (Neuraminidase / NA) Protein
CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白 (Fc 標簽)
VNN2重組人 VNN2 / Vanin-2 蛋白 Protein
大鼠轉錄激活因子5(ATF5)試劑盒 ，英文名： ATF5 ELISA Kit
Mouse thrombin receptor (A) ELISA Kit 小鼠抗受體(A)試劑盒
MouseAngiopoietin4,ANG-4ELISAKit 小鼠血管生成素4(ANG-4)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanleucocyteaigenB27,HLA-B27ELISAKit人類白細胞抗原B27
線粒體內膜功能/膜電位測定試劑盒20次
ELISAKitTPO-Ab大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體
小鼠內皮脂肪酶(EL)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠酶(CA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠胃動素(MTL)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human brain derived neuroophic factor (BDNF) ELISA Kit 人腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒
Humanhighmobilitygroupprotein17,HMG-17ELISAKit 人高速泳動蛋白17(HMG-17)試劑盒 96T/48T 進口分裝
GuineaPigIerleukin1receptoraagonist,IL-1ra試劑盒豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性化學發(fā)光法定量試劑盒20次
Mousecarbonicanhydrase,CAELISAKit小鼠酶(CA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
果蠅GAPDH（內參）抗體
絲裂原活化蛋白激酶MAP4K5抗體
牛原代氣管上皮細胞專用培養(yǎng)基NA重組甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神經酶 (Neuraminidase / NA) Protein
Pepsinogen C peptide 原C蛋白抗原 0.5mgPepsinogen C peptide 原C蛋白抗原
VNN2重組人 VNN2 / Vanin-2 蛋白 Protein
CPLX3 Protein Human 重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白
CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白 (Fc 標簽)
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