詳細(xì)介紹
樣本采集,、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集,;
2,、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次),;
3,、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,,混勻,,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
牛免疫缺陷病毒(BIV)核酸檢測試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增,。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),,避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),,否則會形成引物二聚體,,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會,。
間甲酚英文名稱:M-cresolCAS號:108-39-4分子式:108.14分子量: C7H8O
異硫熒光素(FITC)英文名稱:Fluorescein isocyanate (FITC)CAS號:27072-45-3分子式:389.38分子量: C21H11NO5S
孕諾酮英文名稱:Pregnant womenCAS號:2137-18-0分子式:316.43分子量: C20H28O3
7-溴-5-氯-8-羥喹啉分子式:258.5分子量: C9H5BrClNO英文名稱:7- -5- chloride -8-CAS號:7640-33-7
2-硫脲嘧分子式:128.14分子量: C4H4N2OS英文名稱:2- thioureaCAS號:141-90-2
霉能靈分子式:411.74分子量: C17H13Cl3N4S英文名稱:Mei NenglingCAS號:86598-92-7
水溶性四氮唑分子式:分子量:英文名稱:水溶性四氮唑CAS號:
2-氯-3-吡分子式:138.55分子量: C6H3ClN2英文名稱:2- chloro -3- cyanopyridineCAS號:6602-54-6
十一英文名稱:Eleven acidCAS號:112-37-8分子式:186.29分子量: C11H22O2
2-氯-5-甲分子式:252.48分子量: C7H6ClI英文名稱:2- chloride -5-CAS號:116632-41-8
5-氯并三氮唑分子式:153.57分子量: C6H4ClN3英文名稱:5- three nCAS號:94-97-3
牛免疫缺陷病毒(BIV)核酸檢測試劑盒圖片CDX2/3 尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子2/3抗體 0.2ml
ERG25 甲基固醇羥化酶單加氧酶1抗體 0.2ml
Rabbit Anti-Monkey IgM 兔抗猴IgM 1mg
Persephin PSP抗體 0.1ml
PACAP-27/38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38抗體 0.1ml
phospho-HOMER3(Thr36) 磷酸化HOMER3蛋白抗體 0.1ml
HIPK2 Fas相互作用蛋白激酶2抗體 0.2ml
DYRK3 雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶3抗體 0.2ml
ADCY1 腺苷酸環(huán)化酶1抗體 0.2ml
Cathepsin S 組織蛋白酶S抗體 0.2ml
phospho-Cyclin E(Thr395) 磷酸化周期素E抗體 0.1ml
S100-A9/MRP14/CFAG/Calgranulin B S100A9抗體 0.1ml