PCR試劑盒說明書樣本采集,、存放及運輸：

1,、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集,；

2,、存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,，-70℃以下可長期保存,，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；

3,、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸,。

普通PCR反應流程：

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100mg左右的植物種子（約1/4黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7cm（或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1mL溶液A中,，95℃保溫10-15分鐘,，加入0.1mL溶液B，混勻,，直接取上清液（相當于PCR體積的1/10）作為模板進行PCR,。剩余樣品可以放4℃保存。

自備物品：

15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器

比色皿：用于比色的容器

96孔酶標板：用于比色的容器

分光光度儀：用于比色分析

酶標儀：用于微量樣品比色分析

儲存條件：

14℃或-20℃

準備物品

清理液（A）毫升

染色液（t B）微升

稀釋液（C）毫升

溶解液（tD）毫升

產品說明書1份

PCR試劑盒說明書反應五要素：

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶,、dNTP,、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設計引物應遵循以下原則：

①引物長度：15-30bp，常用為20bp左右,。

②引物擴增跨度：以200-500bp為宜,，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜,，G+C太少擴增效果不佳,，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。

④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補,，特別是3'端的互補,，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶,。

⑤引物3'端的堿基,，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對,，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗,。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點，被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,，這對酶切分析或分子克隆很有好處,。

⑦引物的特異性：

引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol,，以低引物量產生所需要的結果為好,，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會,。

間甲酚英文名稱：M-cresolCAS號：108-39-4分子式：108.14分子量： C7H8O

異硫熒光素(FITC)英文名稱：Fluorescein isocyanate (FITC)CAS號：27072-45-3分子式：389.38分子量： C21H11NO5S

孕諾酮英文名稱：Pregnant womenCAS號：2137-18-0分子式：316.43分子量： C20H28O3

7-溴-5-氯-8-羥喹啉分子式：258.5分子量： C9H5BrClNO英文名稱：7- -5- chloride -8-CAS號：7640-33-7

2-硫脲嘧分子式：128.14分子量： C4H4N2OS英文名稱：2- thioureaCAS號：141-90-2

霉能靈分子式：411.74分子量： C17H13Cl3N4S英文名稱：Mei NenglingCAS號：86598-92-7

水溶性四氮唑分子式：分子量：英文名稱：水溶性四氮唑CAS號：

2-氯-3-吡分子式：138.55分子量： C6H3ClN2英文名稱：2- chloro -3- cyanopyridineCAS號：6602-54-6

十一英文名稱：Eleven acidCAS號：112-37-8分子式：186.29分子量： C11H22O2

2-氯-5-甲分子式：252.48分子量： C7H6ClI英文名稱：2- chloride -5-CAS號：116632-41-8

5-氯并三氮唑分子式：153.57分子量： C6H4ClN3英文名稱：5- three nCAS號：94-97-3

ERG25  甲基固醇羥化酶單加氧酶1抗體 0.2ml

Rabbit Anti-Monkey IgM  兔抗猴IgM 1mg

Persephin  PSP抗體 0.1ml

PACAP-27/38  腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38抗體 0.1ml

phospho-HOMER3(Thr36)  磷酸化HOMER3蛋白抗體 0.1ml

HIPK2  Fas相互作用蛋白激酶2抗體 0.2ml

ADCY1  腺苷酸環(huán)化酶1抗體 0.2ml

Cathepsin S  組織蛋白酶S抗體 0.2ml

phospho-Cyclin E(Thr395)  磷酸化周期素E抗體 0.1ml

S100-A9/MRP14/CFAG/Calgranulin B  S100A9抗體 0.1ml