樣本采集,、存放及運輸：

1,、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；

2,、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）,；

3,、運輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。

普通PCR反應(yīng)流程：

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100mg左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1mL溶液A中,，95℃保溫10-15分鐘，加入0.1mL溶液B,，混勻,，直接取上清液（相當(dāng)于PCR體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存,。

自備物品：

15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器

比色皿：用于比色的容器

96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器

分光光度儀：用于比色分析

酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析

儲存條件：

14℃或-20℃

準(zhǔn)備物品

清理液（A）毫升

染色液（t B）微升

稀釋液（C）毫升

溶解液（tD）毫升

產(chǎn)品說明書1份

反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,，PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度：15-30bp,，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜,，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜,，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補,，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體,，產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。

⑤引物3'端的堿基,，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對,，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,，被擴增的靶序列有適宜的酶切位點，這對酶切分析或分子克隆很有好處,。

⑦引物的特異性：

引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol,，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會,。

2-羥吡分子式：95.1分子量： C5H5NO英文名稱：2- hydroxy pyridineCAS號：142-08-5

4-分子式：161.25分子量： C11H15N英文名稱：4- phenylpiperidineCAS號：771-99-3

漢防己乙素英文名稱：FangchinolineCAS號：436-77-1分子式：608.7233分子量：C37H40N2O6

N'-異丙亞-2-硝磺酰分子式：257.27分子量： C9H11N3O4S英文名稱：N'-, -2-, theCAS號：6655-27-2

N-(5--2-甲)-4-(3-吡)-2-嘧分子式：277.32分子量： C16H15N5英文名稱：N- (5-) -4- (-2-) -2- (3-)CAS號：152460-10-1

丹參酚A英文名稱：Salvia miltiorrhiza phenolic acid ACAS號：96574-01-5分子式：494.447分子量：C26H22O10

[1,3-雙(2,6-二異丙)咪唑-2-甲叉](1,3-二-1,3-丙二酮)銅分子式：675.4分子量： C42H47CuN2O2英文名稱：【3雙（2,6-二異丙）咪唑- 2 -甲叉]（1,3 -二-1,3-丙二酮）銅CAS號：920739-11-3

TTC英文名稱：TTCCAS號：分子式：334.8分子量： C19H15ClN4

3,4-二羥甲分子式：124.14分子量： C7H8O2英文名稱：3,4- two hydroxy tolueneCAS號：452-86-8

4-叔丁吡分子式：135.21分子量： C9H13N英文名稱：4- tert butyl pyridineCAS號：3978-81-2

馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒方法VSV-G tag  VSV-G tag標(biāo)簽抗體 0.1ml

TNFAIP8  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8抗體 0.2ml

AP-TNAP/ALPL  堿性磷酸酶抗體 0.1ml

Anei-ATX/Autotaxin  自分泌運動因子抗體 0.1ml

PAGE1  前列腺相關(guān)P抗原家族成員1抗體 0.2ml

C20ORF141  20號染色體開放閱讀框141抗體 0.2ml

MEI-1  減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體 0.2ml

Glycerol kinase  甘油激酶抗體 0.2ml

CHRDL2  乳腺腫瘤新因子1抗體 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml

CCR8  細(xì)胞表面趨化因子受體8抗體 0.1ml