豬戊型肝炎病毒(HEV)核酸檢測試劑盒方法使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘,，加入0.1 mL 溶液B,，混勻,，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存,。

樣本采集、存放及運輸：
1,、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集,；
2,、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3,、運輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸,。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

二甲亞砜-13C2分子式：80.15分子量： C2H6OS英文名稱：Two methyl -13C2CAS號：136321-15-8

4-(二氟溴甲)溴分子式：分子量：英文名稱：4- (Xiu Jiaji - two f)CAS號：2358-32-9

7-氯-4-羥-2-甲喹啉分子式：193.63分子量： C10H8ClNO英文名稱：7- -4- hydroxy -2- methyl groupCAS號：15644-88-9

4-溴-3-硝三氟甲分子式：270分子量： C7H3BrF3NO2英文名稱：4- -3- nitro threeCAS號：349-03-1

4,5-二氟酞腈分子式：164.11分子量： C8H2F2N2英文名稱：4,5- two fluorine phthalocyanineCAS號：134450-56-9

并四咪唑分子式：252.34分子量： C15H12N2S英文名稱：并四咪唑CAS號：885051-07-0

1-氯甲萘分子式：176.64分子量： C11H9Cl英文名稱：1- methyl naphthaleneCAS號：86-52-2

重酸氫鉀分子式：389.91分子量： KHI2O6英文名稱：Potassium hydrogen carbonateCAS號：13455-24-8

溴代十六烷吡分子式：384.44分子量： C21H38BrN英文名稱：Bromine sixteen alkyl pyridineCAS號：140-72-7

4,4'-二乙炔聯(lián)分子式：202.26分子量： C16H10英文名稱：4,4'- two acetylene baseCAS號：38215-38-2

3--5-甲吡分子式：118.14分子量： C7H6N2英文名稱：3- cyano -5- methyl pyridineCAS號：42885-14-3

豬戊型肝炎病毒(HEV)核酸檢測試劑盒方法SPHK1  鞘氨醇激酶1抗體 0.2ml

phospho-RPS6KA1(Ser363)  磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體 0.1ml

Metronidazole(1C2)  甲硝唑單克隆抗體 0.2ml

GADD45 gamma  生長抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ 0.2ml

phospho-GNA12(Ser68)  磷酸化鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體 0.1ml

TRAP/Tartrate Resistant Acid Phosphatase  端粒酶調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白抗體 0.1ml

C15orf52  15號染色體開放閱讀框52抗體 0.2ml

C3a Receptor/C3aR  過敏毒素C3受體/補體C3受體抗體 0.2ml

S100A6BP/CACYBP  鈣周期素結(jié)合蛋白抗體 0.2ml

Phospho-Zap-70(Tyr493)  磷酸化zeta相關(guān)蛋白70抗體 0.1ml

Layilin  透明質(zhì)酸受體抗體 0.1ml

HSP47  熱休克蛋白-47抗體 0.1ml

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶,、dNTP,、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列,， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp,，常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜,，特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳,，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),，避免兩條引物間互補,，特別是3'端的互補,，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基,，應(yīng)嚴(yán)格要求配對,，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,， 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol,，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,，且可增加引物之間形成二聚體的機會,。