詳細(xì)介紹
??蒲?BCV)核酸檢測試劑盒圖片使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,,95℃保溫10-15 分鐘,,加入0.1 mL 溶液B,混勻,,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR,。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
??蒲?BCV)核酸檢測試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集,、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集,;
2,、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次),;
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸,。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
??蒲?BCV)核酸檢測試劑盒圖片15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
鬼臼毒素英文名稱:PodophyllotoxinCAS號:518-28-5分子式:414.41188分子量:C22H22O8
4-溴-2-甲吡分子式:172.02分子量: C6H6BrN英文名稱:4- -2- methyl pyridineCAS號:22282-99-1
丙二丁英文名稱:Propylene glycol butyl etherCAS號:29387-86-8分子式:132.20074分子量: C7H16O2
氯代氫三(三膦)釕(II)甲加合物分子式:分子量:英文名稱:Three (three phenyl phosphate) ruthenium (II) toluene adductCAS號:217661-36-4
溶劑藍(lán)35英文名稱:Solvent blue 35CAS號:17354-14-2分子式:350.45分子量: C22H26N2O2
鈣黃綠素英文名稱:CalceinCAS號:1461-15-0分子式:622.55分子量: C30H26N2O13
2-噻唑啉分子式:102.16分子量: C3H6N2S英文名稱:2- aminothiazolineCAS號:1779-81-3
隱綠原英文名稱:Chlorogenic acidCAS號:905-99-7分子式:354.31分子量:C16H18O9
5-溴-2-羥甲吡分子式:188.02分子量: C6H6BrNO英文名稱:5- bromide -2-CAS號:88139-91-7
3--4-吡唑分子式:108.1分子量: C4H4N4英文名稱:3- -4- cyano amino pyrazoleCAS號:16617-46-2
1,8-二氮-9-芴酮(DFO)英文名稱:1,8- two n -9- fluorenone (DFO)CAS號:54078-29-4分子式:182.18分子量: C11H6N2O
牛科研(BCV)核酸檢測試劑盒圖片phospho-p107/RBL1(Ser975) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體 0.1ml
EST1A 端粒酶結(jié)合蛋白EST1A抗體 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml
Mouse Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
Phospho-TLK1(Ser695) 磷酸化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體 0.1ml
ERdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10蛋白抗體 0.2ml
ENC1/KLHL35 外胚層神經(jīng)皮層蛋白1抗體 0.2ml
Caspase 2 半胱胺酸蛋白酶-2抗體 0.1ml
BMPER BMP內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.2ml
THRA1 甲狀腺激素受體α1抗體 0.2ml
RAP1GDS1 G蛋白GTP-GDP解離刺激因子1抗體 0.2ml
Mouse Anti-human IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶,、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會,。