牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）核酸檢測試劑盒方法是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品,， 含有Taq DNA 聚合酶,、dNTPs,、MgCl2,、反應(yīng)緩沖液,、PCR 增強(qiáng)劑,、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),，具有廣泛的用途,。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1,、牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)核酸檢測試劑盒方法樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集,；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,，-70℃以下可長期保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3,、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸,。
普通PCR反應(yīng)流程:

?

使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B,，混勻,，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR,。剩余樣品可以放4℃保存。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	分類
牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)核酸檢測試劑盒方法	48T	PCR檢測試劑盒

自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

反應(yīng)五要素:
牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)核酸檢測試劑盒方法參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶,、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度,。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列,， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp,，常用為20bp左右,。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段,。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜,，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機(jī)分布,，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),，避免兩條引物間互補(bǔ),，特別是3'端的互補(bǔ),，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn),， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol,，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì),。

5--2-(三氟甲)并咪唑分子式：201.15分子量： C8H6F3N3英文名稱：5- -2- (three amino methyl fluoride) benzimidazoleCAS號(hào)：3671-66-7

2-甲吡分子式：93.13分子量： C6H7N英文名稱：2- methyl pyridineCAS號(hào)：109-06-8

4-溴吡唑分子式：146.97分子量： C3H3BrN2英文名稱：4- bromideCAS號(hào)：2075-45-8

妥英鈉分子式：275.26分子量： C15H12N2NaO2英文名稱：Phenytoin sodiumCAS號(hào)：630-93-3

直接蘭2B英文名稱：Direct blue 2BCAS號(hào)：分子式：分子量：

直接深棕MM英文名稱：Direct dark brown MMCAS號(hào)：分子式：分子量：

4,4'-二分子式：168.28分子量： C10H20N2英文名稱：4,4'- two piperidineCAS號(hào)：15336-72-8

α,α'-雙(4-)-1,4-二異丙分子式：344.5分子量： C24H28N2英文名稱：Alpha, alpha '- bis (4- amino phenyl) -1,4- two isopropyl benzeneCAS號(hào)：298313

甜橙黃酮英文名稱：SinensetinCAS號(hào)：2306-27-6分子式：372.39分子量：C20H20O7

4-羥甲噻唑分子式：115.15分子量： C4H5NOS英文名稱：4- hydroxymethyl thiazoleCAS號(hào)：1875983

3-甲酸分子式：129.16分子量： C6H11NO2英文名稱：3- piperidine formic acidCAS號(hào)：498-95-3

牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)核酸檢測試劑盒方法Mouse Anti-rabbit IgG/APC  APC標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml

TIMP-2  金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體 0.1ml

Dog IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml

Hairless  無毛發(fā)蛋白抗體 0.2ml

CTR9  血小板活化因子CTR9抗體 0.2ml

Robo2  軸突導(dǎo)向受體蛋白2抗體 0.1ml

CCL6/C10  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL6抗體 0.2ml

ARMER  ARMER抗體 0.2ml

Mouse Anti-human IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml

SSA/52KDa Ro  核糖核蛋白抗原抗體 0.2ml

PEPT1  腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 0.1ml

Matriptase  蛋白裂解酶（一種新的癌基因）抗體 0.1ml