反應(yīng)五要素:
西尼羅河病毒(WNV)核酸檢測試劑盒方法參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,，只要知道任何一段模板DNA序列,， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp,，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜,，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜,，G+C太少擴增效果不佳,，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補,，特別是3'端的互補,，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴格要求配對,，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,， 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B,，混勻,，直接取上清液（相當于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存,。

樣本采集,、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集,；
2,、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）,；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸,。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
西尼羅河病毒(WNV)核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

1,5-萘二磺鈉英文名稱：1,5- naphthalene two sulfonic acidCAS號：1655-29-4分子式：332.25334分子量： C10H6Na2O6S2

聚(甲)硅烷支撐鈀/氧鋁混合催劑分子式：分子量：英文名稱：Poly (Jia Benji) silane supported palladium / alumina catalystCAS號：#$!!#

三氯三乙絡(luò)鋁分子式：247.51分子量： C6H15Al2Cl3英文名稱：Three chlorine three ethylCAS號：12075-68-2

間二(三氟甲)分子式：214.11分子量： C8H4F6英文名稱：Between two (three f) benzeneCAS號：402-31-3

對溴甲分子式：171.04分子量： C7H7Br英文名稱：To bromine tolueneCAS號：106-38-7

西瑞香素英文名稱：DaphnoretinCAS號：2034-69-7分子式：352.3分子量：C19H12O7

二磷酸鉀分子式：224.28分子量： C12H10KP英文名稱：Two phenyl potassium phosphateCAS號：15475-27-1

性蘭英文名稱：Acid blueCAS號：2379-74-0分子式：393.31分子量： C18H10Cl2O2S2

2,6-二氯-3-羥-4-吡甲醛分子式：192分子量： C6H3Cl2NO2英文名稱：2,6- two -3- hydroxy -4- pyridine formaldehydeCAS號：185423-26-1

N-CBZ-4-乙酸-分子式：277.32分子量： C15H19NO4英文名稱：N-CBZ-4- - piperidine acetateCAS號：63845-28-3

2-芐鹽酸鹽分子式：211.73分子量： C12H18ClN英文名稱：2- benzyl piperidine hydrochlorideCAS號：

西尼羅河病毒(WNV)核酸檢測試劑盒方法Rabbit Anti-mouse IgG  兔抗小鼠IgG 1mg

SRC  src原癌基因抗體 0.2ml

PACAP-38  腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體 0.1ml

Smad3  細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 0.1ml

phospho-JunB(Ser79)  磷酸化活化蛋白激酶B抗體 0.1ml

MICS1  生長激素誘導(dǎo)跨膜蛋白抗體（真皮乳頭源性蛋白2） 0.2ml

BCL2L12  BCL2樣12含脯氨酸蛋白抗體 0.2ml

SV2A  突觸泡蛋白2A抗體 0.2ml

C1ORF74  1號染色體開放閱讀框74抗體 0.2ml

S100A11  S100鈣結(jié)合蛋白A11抗體 0.1ml

ZNF217  鋅指脂蛋白217抗體 0.2ml

LASS1  長壽相關(guān)基因lASS1抗體 0.2ml