詳細介紹
反應五要素:
假結核耶爾森菌PCR檢測試劑盒品牌參加PCR反應的物質主要有五種即引物,、酶,、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,,避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,,產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,,應嚴格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會,。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,,加入0.1 mL 溶液B,,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR,。剩余樣品可以放4℃保存,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
假結核耶爾森菌PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集,、存放及運輸:
1,、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2,、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次),;
3,、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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自備物品:
假結核耶爾森菌PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
4-羥甲-4'-甲-2,2'-聯(lián)吡分子式:200.24分子量: C12H12N2O英文名稱:4-, -4'-, -2,2'-CAS號:81998-04-1
瑞氏色素/瑞氏染色液英文名稱:Red pigment / Wright's stainCAS號:68988-92-1分子式:分子量: C36H27N3O5Br4
5-溴噻唑分子式:164.02分子量: C3H2BrNS英文名稱:5- thiazole bromideCAS號:3034-55-7
8-氯喹啉分子式:163.61分子量: C9H6ClN英文名稱:8- chlorideCAS號:611-33-6
鉀分子式:786.4分子量: HgI4K2英文名稱:Potassium mercuric iodideCAS號:7783-33-7
大豆皂苷AA英文名稱:Soybean saponin AACAS號:117230-33-8分子式:1365.46分子量:C64 H100 O31
氘代溴分子式:162.04分子量: C6BrD5英文名稱:Deuterated bromobenzeneCAS號:4165-57-5
2-溴-3-三氟甲吡分子式:226分子量: C6H3BrF3N英文名稱:2- three -3-CAS號:175205-82-0
直接凍黃G英文名稱:Direct frozen yellow GCAS號:2870-32-8分子式:680.66分子量: C30H26N4Na2O8S
1-戊咪唑分子式:138.21分子量: C8H14N2英文名稱:1- methyl imidazoleCAS號:
并噻吩砜分子式:166.2分子量: C8H6O2S英文名稱:Benzene and thiopheneCAS號:825-44-5
假結核耶爾森菌PCR檢測試劑盒品牌phospho-Tau protein(Ser262) 磷酸化微管相關蛋白抗體 0.1ml
PDX1 胰島素促進因子抗體(胰十二指腸同源異型盒蛋白) 0.1ml
RAP2B 原癌基因相關蛋白RAP2B抗體 0.2ml
A Raf/ARAF A-Raf抗體 0.1ml
GABRA5/GABA A Receptor alpha 5 γ1氨基受體α5/GABRα5抗體 0.1ml
C11ORF16 11號染色體開放閱讀框16抗體 0.2ml
FSTL1/FRP 卵泡相關蛋白1 0.1ml
RNF158 心臟蛋酸酶1結合蛋白/環(huán)指蛋白158抗體 0.2ml
phospho-STAT6(Thr645) 磷酸化信號轉導和轉錄激活因子6抗體 0.1ml
SEK1/MKK4 絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 0.2ml
Integrin alpha L/CD11a 整合素αL抗體 0.1ml
HA tag(12CA5) HA tag標簽單克隆抗體 0.1ml