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詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
沃爾巴克氏菌通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶,、dNTP,、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度,。理論上,，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增,。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右,。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜,，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜,，G+C太少擴(kuò)增效果不佳,，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ),，特別是3'端的互補(bǔ),，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn),， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol,，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B,，混勻,，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
沃爾巴克氏菌通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集,、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集,；
2,、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）,；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸,。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
沃爾巴克氏菌通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
DL-α-Tocopherolmethoxypolyethyleneglycolsuccinatesolution英文名稱：DL- -Tocopherol methoxypolyethylene glycol succinate solutionCAS號(hào)：1309573-60-1分子式：分子量：
辛酰分子式：158.24分子量： C8H18N2O英文名稱：Xin XianjingCAS號(hào)：6304-39-8
精吡氟禾草靈英文名稱：Fluazifop-p-butylCAS號(hào)：79241-46-6分子式：383.36分子量： C19H20F3NO4
龍膽苦苷英文名稱：GentiopicrosideCAS號(hào)：20831-76-9分子式：356.33分子量：C16H20O9
DBD-ED分子式：285.32分子量： C10H15N5O3S英文名稱：dbd-edCAS號(hào)：189373-41-9
四氫呋(THF)分子式：72.11分子量： C4H8O英文名稱：Tetrahydrofuran (THF)CAS號(hào)：109-99-9
氟鈦分子式：104.86分子量： F3Ti英文名稱：Titanium fluorideCAS號(hào)：13470-08-1
(S)-3-四氫呋分子式：87.12分子量： C4H9NO英文名稱：(S) -3- amino tetrahydrofuranCAS號(hào)：104530-79-2
四氯酞英文名稱：Four + phthalideCAS號(hào)：27355-22-2分子式：271.9分子量： C8H2Cl4O2
蘇木精英文名稱：Su MujingCAS號(hào)：517-28-2分子式：302.28分子量： C16H14O6
2,4-二溴甲分子式：249.93分子量： C7H6Br2英文名稱：2,4- dibromo tolueneCAS號(hào)：31543-75-6
沃爾巴克氏菌通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌Galectin 9 半乳糖凝集素9抗體 0.2ml
GPR55 蛋白偶聯(lián)受體55抗體 0.2ml
Nox4/NADH NADPH氧化酶4抗體 0.1ml
Phospho-Rb(Ser795) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
AMFR/Gp78/RNF45 環(huán)指蛋白45/自分泌運(yùn)動(dòng)因子受體抗體 0.2ml
TSBP 特異蛋白抗體 0.2ml
ACA11 擬南芥ACA11抗體 1ml
TFE3 轉(zhuǎn)錄因子E3 0.1ml
RAIDD CASP2凋亡相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
Pancreatic Amylase 胰淀粉酶抗體 0.1ml
TRAF3/CD40bp 腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體 0.1ml
PTEN/MMAC1(CT) 一種腫瘤抑制基因抗體（C端） 0.1ml
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