詳細(xì)介紹
田鼠痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,,混勻,,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存,。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 分類(lèi) |
田鼠痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集,、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集,;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3,、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸,。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
田鼠痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
2,3-二氯硝分子式:192分子量: C6H3Cl2NO2英文名稱(chēng):2,3- twoCAS號(hào):3209-22-1
2-甲并噻唑分子式:149.21分子量: C8H7NS英文名稱(chēng):2- MethylbenzothiazoleCAS號(hào):120-75-2
2-乙酰-5-氟吡分子式:154.14分子量: C7H7FN2O英文名稱(chēng):2- acetyl -5-CAS號(hào):100304-88-9
聯(lián)甲酰分子式:210.22分子量: C14H10O2英文名稱(chēng):The methylCAS號(hào):134-81-6
3-氯-4-溴硝分子式:分子量:英文名稱(chēng):3- chloride -4-CAS號(hào):54436
4-(4-吡)甲醛分子式:183.21分子量: C12H9NO英文名稱(chēng):4- (4-) Ben JiaquanCAS號(hào):99163-12-9
4--1,2,3-三氮唑分子式:145.16分子量: C8H7N3英文名稱(chēng):41,2,3 -三氮唑CAS號(hào):1680-44-0
2,6-二氯-4-三氟分子式:245.03分子量: C7H5Cl2F3N2英文名稱(chēng):2,6- two -4- three chlorine fluorine methyl hydrazineCAS號(hào):86398-94-9
二氯二茂鋯英文名稱(chēng):Two CL twoCAS號(hào):1291-32-3分子式:292.32分子量: C10H10Cl2Zr
蟾毒靈英文名稱(chēng):BufalinCAS號(hào):465-21-4分子式:386.52分子量:C24H34O4
3-乙吡分子式:121.14分子量: C7H7NO英文名稱(chēng):3- ethyl pyridineCAS號(hào):350-03-8
田鼠痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌CDAN1 先天性紅細(xì)胞生成異常性貧血蛋白1抗體 0.2ml
Goat Anti-human IgM/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗人IgM 0.1ml
phospho-Tau protein(Thr205) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
PLGF/PIGF (human) 胎盤(pán)生長(zhǎng)相關(guān)抗體(人) 0.1ml
Mammaglobin A 乳腺珠蛋白1抗體 0.2ml
KCND2/Kv4.2 電壓門(mén)控性鉀通道蛋白Kv4.2抗體 0.2ml
EpCAM/CD326 上皮特異性抗原抗體 0.1ml
LRRC59 LRRC59蛋白抗體 0.2ml
Phospho-Met(Tyr1349) 磷酸化肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體 0.1ml
ATP6IP2 ATP酶H+轉(zhuǎn)運(yùn)溶酶體輔助蛋白2抗體 0.2ml
CD54/ICAM-1 細(xì)胞間粘附分子-1抗體 0.1ml
Paxillin 樁蛋白Paxillin抗體 0.1ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶,、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度,。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增,。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右,。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),,避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),,否則會(huì)形成引物二聚體,,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性,。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。