反應(yīng)五要素:
布氏岡比亞錐蟲品牌參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶,、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列,， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp,，常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜,，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補,，特別是3'端的互補,，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基,，應(yīng)嚴(yán)格要求配對,，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol,，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,，且可增加引物之間形成二聚體的機會,。

使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,，95℃保溫10-15 分鐘,，加入0.1 mL 溶液B，混勻,，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR,。剩余樣品可以放4℃保存。

樣本采集,、存放及運輸：
1,、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2,、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）,；
3,、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
布氏岡比亞錐蟲品牌15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

布氏岡比亞錐蟲品牌Insig2  胰島素誘導(dǎo)基因2抗體 0.1ml

IKK gamma/IKBKG  KB抑制蛋白激酶γ抗體 0.2ml

AFP  甲胎蛋白抗體 0.1ml

PAS1C1  核纖層蛋白A相關(guān)結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 0.2ml

Deltex-1  DTX1抗體 0.2ml

BRN4/POU3F4  腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白抗體 0.2ml

Ubiquitin/UBC/UB  泛素蛋白抗體 0.2ml

phospho-ROCK2(Thr249)  磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體 0.1ml

GCS/glucosylceramide synthase  谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗體 0.1ml

RAMP1  受體活性修飾蛋白1抗體 0.2ml

PRPF4  PRPF4蛋白抗體 0.2ml

HIFPH4  缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰4羥化酶抗體 0.2ml