反應(yīng)五要素:
皺紋毛圓線蟲PCR檢測試劑盒品牌參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶,、dNTP,、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度,。理論上,，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增,。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右,。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜,，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜,，G+C太少擴(kuò)增效果不佳,，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ),，特別是3'端的互補(bǔ),，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對,，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn),， 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol,，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會,。

使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘,，加入0.1 mL 溶液B,，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR,。剩余樣品可以放4℃保存,。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1,、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集,；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,，-70℃以下可長期保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3,、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸,。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品：
皺紋毛圓線蟲PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

QG-56(人肺扁平上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

PBS規(guī)格：500mlgersion

NCI-H460(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

mEPC, 小鼠內(nèi)祖細(xì)胞-骨髓gersion

MLTC-1(小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HL-60, 人早幼粒白血病細(xì)胞

Anglne(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

D283 Med(人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠胚胎肝細(xì)胞英文名稱：BNL CL.2

A9(小鼠下結(jié)締組織細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

天狼星紅染色試劑盒規(guī)格：200ml

皺紋毛圓線蟲PCR檢測試劑盒品牌Mouse Anti-Goat IgG/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

FOG1  GATA結(jié)合蛋白1伴侶蛋白抗體 0.2ml

ET-1  內(nèi)皮素-1抗體 0.2ml

DHRS7  視網(wǎng)膜短鏈脫氫酶/還原酶家族7抗體 0.2ml

AU1 tag  AU1 tag標(biāo)簽抗體 0.1ml

CARM1  蛋白氨酸N甲基4抗體 0.1ml

phospho-Bcl 10(Ser218)  磷酸化Bcl-10抗體 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG/PE  PE標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml

Phospho-TAK1(Ser412)  磷酸化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶1 0.1ml

Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759)  磷酸化磷酯酶Cγ2抗體 0.1ml

phospho-E2F1 (Ser337)  磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體 0.1ml