詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
鴿毛滴蟲PCR檢測(cè)試劑盒多少錢參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶,、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度,。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增,。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右,。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),,特別是3'端的互補(bǔ),,否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),,以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn),, 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì),。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,,混勻,,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
鴿毛滴蟲PCR檢測(cè)試劑盒多少錢 | 50T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集,、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集,;
2,、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次),;
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸,。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
鴿毛滴蟲PCR檢測(cè)試劑盒多少錢15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書 1份
亞硫酸鹽多粘菌素磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ)/SPS瓊脂/SPS Agar產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
SHZ-88(大鼠腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H226(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Ni-Agarose His標(biāo)簽蛋白純?cè)噭┖?ml,、2ml國(guó)產(chǎn)gersion
BC-020(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
IBRS-2(豬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國(guó)倉(cāng)鼠肺成纖維樣細(xì)胞英文名稱:CHL-Don
cECL Western Blot Kit/低背景學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒25ml、100ml,、250ml試劑盒
小鼠虹膜色素上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
鴿毛滴蟲PCR檢測(cè)試劑盒多少錢Hirudin 水蛭素抗體 0.2ml
5-HT 5-羥色胺抗體 0.1ml
BPIL3 殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體 0.2ml
Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) 磷酸化酪氨酸激酶A抗體 0.1ml
PI3K/PI3 kinase p85 alpha subunit 磷脂酰肌醇激酶抗體 0.1ml
MRP1/ABCC1 多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
Perlecan/Heparan Sulfate Proteoglycan 2 硫酸乙酰肝素蛋白多糖2 0.1ml
Cyclophilin D 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)40抗體 0.2ml
CSFV/Classical swine fever virus 豬瘟病毒抗體 0.2ml
DHFR 二氫葉酸還原酶抗體 0.2ml
phospho-EGFR (Tyr1092) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 0.1ml
Angiopoietin 2/ANG2 血管生成素2抗體 0.1ml