詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
唾液鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度,。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增,。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右,。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),,避免兩條引物間互補(bǔ),,特別是3'端的互補(bǔ),,否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn),, 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性,。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,,加入0.1 mL 溶液B,混勻,,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR,。剩余樣品可以放4℃保存,。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 分類(lèi) |
唾液鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián) | 50T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1,、樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集,;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次),;
3,、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸,。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
唾液鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
TT(人甲狀腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
TE-11(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SW 1353(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
QGY-7701, 人肝細(xì)胞gersion
Caki-2(人腎透明細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MRC5/成纖維細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)gersion
Raji(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)細(xì)胞系
Calu-3(人肺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
EPC, 大鼠血管內(nèi)祖細(xì)胞
小鼠腎系膜細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
唾液鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)RBR2/Rb2 p130 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白2抗體 0.2ml
AQP9 水通道蛋白-9抗體 0.1ml
GALT 磷酸半乳糖尿苷酸轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
MURF2 肌肉特異性環(huán)指蛋白2抗體 0.2ml
Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) 磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 0.1ml
PRL3/PRL-R 磷酸酯酶3蛋白抗體 0.2ml
CK18 細(xì)胞角蛋白18抗體(C端) 0.1ml
SIRT4/SIR 2 like protein 4 沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
phospho-PTPRA(Ser180) 磷酸化酪氨酸磷酸酶α抗體 0.1ml
POT1 端粒保護(hù)蛋白1抗體 0.2ml
C20orf132 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框132抗體 0.2ml
H5N1-H5 禽流感H5亞型全病毒抗體 0.1ml