詳細介紹
反應五要素:
海豚鏈球菌PCR檢測試劑盒品牌參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶,、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會,。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,,加入0.1 mL 溶液B,,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR,。剩余樣品可以放4℃保存,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
海豚鏈球菌PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1,、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集,;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,,-70℃以下可長期保存,,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3,、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸,。
普通PCR反應流程:
?
自備物品:
海豚鏈球菌PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
兔IgG-兔IgG5 x 1ml國產(chǎn)
3.5% NaC1鳥氨酸脫羧酶發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
人腎細胞英文名稱:OS-RC-2
O157顯色培養(yǎng)基/大腸桿菌O157顯色培養(yǎng)基/O157 Chromogenic Medium用于大腸桿菌O157菌的顯色培養(yǎng)1升國產(chǎn)/進口
人間充質(zhì)干細胞-脂肪
副溶血性弧菌瓊脂副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
黃芪黃酮規(guī)格:20mg/支;98%
馬丁肉湯1萬毫升/袋國產(chǎn)/進口
RK1(大鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2gersion
小鼠骨髓瘤細胞英文名稱:FO
四硫磺酸鈉亮綠增菌液/四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(chǔ)/TTB沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
海豚鏈球菌PCR檢測試劑盒品牌Rabbit Anti-horse IgG/Cy7 Cy7標記的兔抗馬IgG 0.1ml
Mouse anti-rat IgG ascites 小鼠抗大鼠IgG腹水 1ml
CXorf21 X染色體開放閱讀框21抗體 0.2ml
KLHL7 kelch樣蛋白7抗體 0.2ml
FBXL5 FBXL5蛋白抗體 0.2ml
Ninein/GSK3B interacting protein GSK3B相互作用蛋白抗體 0.2ml
CKS2 細胞周期蛋白依賴性激酶調(diào)節(jié)亞基2抗體 0.2ml
CD54/ICAM-1 細胞間粘附分子-1抗體 0.1ml
Rabbit Anti-Bov IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗牛IgG 0.1ml
Phospho-YAP1(Tyr407) 磷酸化原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
RelB 核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體 0.2ml
Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) 磷酸化內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長因子抗體 0.1ml