詳細介紹
反應五要素:
念珠狀鏈桿菌PCR檢測試劑盒多少錢參加PCR反應的物質主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,,避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,,混勻,,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
念珠狀鏈桿菌PCR檢測試劑盒多少錢 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集,、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集,;
2,、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,,但應避免反復凍融(zui多凍融3次),;
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸,。
普通PCR反應流程:
?
自備物品:
念珠狀鏈桿菌PCR檢測試劑盒多少錢15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
匹克氏肉湯基礎B/Pick,,s Broth Base B一次性使用衛(wèi)生用品中溶血性鏈球菌的檢驗250克國產(chǎn)/進口
大鼠成年表角質形成層細胞*培養(yǎng)基100mL
小麥胚芽粉/Wheat gern powderBR500克國產(chǎn)/進口
SP Mouse HRP Kit(DAB)/鼠Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國產(chǎn)
NCI-H520(人肺鱗細胞)5×106cells/瓶×2
OVCAR-3(人卵巢細胞)5×106cells/瓶×2gersion
HO-8910PM(人高轉移卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-231(ATCC來源), 人腺細胞
LoVo(人大腸細胞)5×106cells/瓶×2
HFF-1(人包成纖維細胞)5×106cells/瓶×2
769-P(人腎細胞腺細胞)5×106cells/瓶×2
念珠狀鏈桿菌PCR檢測試劑盒多少錢RNASE4/Angiogenin 血管生成素核糖核酸酶4抗體(肌萎縮性側索硬化癥蛋白) 0.1ml
Kazrin Kazrin蛋白抗體 0.2ml
IL-6 白介素6抗體 0.1ml
SLC27A6/ACSVL2 脂肪酸轉運蛋白6抗體 0.2ml
GST tag/GSTM1 GST標簽蛋白抗體 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/Cy7 Cy7標記的兔抗猴IgG 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG/Cy5 Cy5標記的羊抗牛IgG 0.1ml
CLCN3/CLC-3 氯離子通道蛋白3抗體 0.2ml
C21ORF62 21號染色體開放閱讀框62抗體 0.2ml
RASAL1 RAS蛋白樣激活劑1抗體 0.2ml
p55/DCAF1 染色質組裝因子1P55抗體 0.2ml
phospho-Pyk2/PTK2B(Tyr402) 磷酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗體 0.1ml