沃氏葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B,，混勻,，直接取上清液（相當于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存,。

樣本采集,、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集,；
2,、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存,，但應(yīng)避免反復凍融（zui多凍融3次）,；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸,。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品：
沃氏葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

NEC(人食管細胞)5×106cells/瓶×2

Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit/Nc-細胞核-漿蛋白抽提試劑盒50次國產(chǎn)gersion

D283 Med(人腦髓母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2

MCF-7 [MCF7], 人腺細胞系

L1210(小鼠白血病細胞)5×106cells/瓶×2

Hep B1.2(人肝細胞)5×106cells/瓶×2

豬腎細胞英文名稱：PK（15）

CHO/中華倉鼠卵巢細胞株國產(chǎn)

小鼠結(jié)腸細胞英文名稱：CT-26 WT

7.5% NaHCO3溶液規(guī)格：100ml

人子宮內(nèi)膜細胞英文名稱：Ishikawa

沃氏葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌Rabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的兔抗生物素抗體IgG 0.1ml

Tuberin/TSC2  馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 0.2ml

Phospho-Rb (Thr821)  磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml

Eukaryotic aspartyl protease  天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗體 1ml

KMT3B/NSD1/ARA267  組蛋白甲基化KMT3B抗體（雄激素受體激活蛋白） 0.2ml

Gentamicin  慶大霉素抗體 0.2ml

CASC3/MLN51  腫瘤易感候選基因3抗體 0.1ml

ATM  毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體 0.1ml

WT-1/Wilms Tumor Protein  腎母細胞瘤蛋白抗體 0.1ml

E-cadherin/CD324  上皮鈣粘附分子抗體 0.1ml

PNMT  苯甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml

MMP-16  基質(zhì)金屬蛋白酶-16抗體 0.1ml

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,，只要知道任何一段模板DNA序列,， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp,，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜,，特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳,，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機分布,，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),，避免兩條引物間互補,，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體,，產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基,，應(yīng)嚴格要求配對,，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol,，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,，且可增加引物之間形成二聚體的機會,。