詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
海德堡沙門(mén)氏菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶,、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度,。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,,常用為20bp左右,。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),,特別是3'端的互補(bǔ),,否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),,以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn),, 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì),。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,,加入0.1 mL 溶液B,,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR,。剩余樣品可以放4℃保存,。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 分類(lèi) |
海德堡沙門(mén)氏菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián) | 50T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1,、樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集,;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次),;
3,、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸,。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
海德堡沙門(mén)氏菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
AsPC-1(人胰腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠白血病細(xì)胞英文名稱(chēng):M1
10% NaC1胰胨水發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人食管細(xì)胞英文名稱(chēng):Eca-109
MR-VP發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人結(jié)直腸腺細(xì)胞英文名稱(chēng):Caco-2
膽鹽糖培養(yǎng)基/BL培養(yǎng)基/膽鹽糖增菌液/糖膽鹽增菌液/Bile Lactose Broth大腸桿菌和綠膿桿菌的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
淋巴白血病英文名稱(chēng):L1210瘤
亮綠瓊脂培養(yǎng)基/Brilliant Green Agar沙門(mén)氏菌分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞英文名稱(chēng):C6
三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基/三糖鐵培養(yǎng)基/TSI瓊脂/Triple Sugar Iron Agar腸桿菌科細(xì)菌的生試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
海德堡沙門(mén)氏菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)黃芪皂苷I 英文名稱(chēng) 黃芪皂甙I 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Astragaloside I
柴胡皂苷 a 英文名稱(chēng) 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
英文名稱(chēng) 供殘留溶劑檢查用 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
馬錢(qián)苷 英文名稱(chēng) 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
蝥素 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Cantharidin
白藜蘆醇 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Resveratrol
氯普噻噸 英文名稱(chēng) 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: 檢查
吉非羅齊 英文名稱(chēng) 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: 含量測(cè)定
左炔諾孕酮 英文名稱(chēng) 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量:
知母皂苷A-Ⅲ 英文名稱(chēng) Timosaponin A-Ⅲ 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: ≥98%
二嗪磷 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):333-41-5 250MG 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: