詳細介紹
反應五要素:
都柏林沙門氏菌PCR檢測試劑盒品牌參加PCR反應的物質主要有五種即引物,、酶,、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產生所需要的結果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會,。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,,加入0.1 mL 溶液B,,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR,。剩余樣品可以放4℃保存,。
產品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
都柏林沙門氏菌PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1,、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集,;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,,-70℃以下可長期保存,,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3,、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸,。
普通PCR反應流程:?
自備物品:
都柏林沙門氏菌PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
非洲爪蟾胚胎細胞英文名稱:ACTE1
明膠培養(yǎng)基/Gelatin Medium細菌明膠液試驗250克國產/進口
大鼠肝細胞瘤細胞英文名稱:H-4-II-E
無菌豬血清/Sterile Defidrinated Pig BloodBR100/400毫升國產/進口
SV-HUC-1(人膀胱上永生細胞)5×106cells/瓶×2
RIN-m5f(大鼠胰島β細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
PC-3M(人前列腺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
SF-295(人XG惡性膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2
MGC80-3(人胃細胞)5×106cells/瓶×2gersion
NCI-H1299(人非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2
HO-8910(人卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
都柏林沙門氏菌PCR檢測試劑盒品牌玉竹 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: TLC法鑒別
環(huán)丙唑醇 標準品 CAS號:113096-99-4 100MG 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量:
阿卡波糖 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量:
7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: 有關物質檢查
番瀉苷B 英文名稱 Sennoside B 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥96%
鹽酸利多卡因 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: 含量測定
對氧乙酸 標準品 CAS號:122-88-3 250mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量:
曲克蘆丁 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量:
鼠尾草酸 英文名稱 Carnosic acid 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
石吊蘭素 英文名稱 鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量:
海柯皂苷元 英文名稱 hecogenin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥95%