詳細介紹
反應五要素:
薩比亞病毒PCR檢測試劑盒多少錢參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶,、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構,,避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,,產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,,應嚴格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會,。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,,加入0.1 mL 溶液B,,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR,。剩余樣品可以放4℃保存,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
薩比亞病毒PCR檢測試劑盒多少錢 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1,、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集,;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,,-70℃以下可長期保存,,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3,、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸,。
普通PCR反應流程:
?
自備物品:
薩比亞病毒PCR檢測試劑盒多少錢15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
CNE(人鼻咽細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠晶狀體上細胞*培養(yǎng)基100mL
786-O(人腎透明細胞細胞)5×106cells/瓶×2
人子宮內(nèi)膜腺細胞英文名稱:HEC-1-A
BETA-SSA瓊脂/BETA-SSA Agar鏈球菌的選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
人腺細胞英文名稱:LCC1
支原體培養(yǎng)基基礎/支原體瓊脂基礎培養(yǎng)基/Mycoplasma Agar Base培養(yǎng)支原體的基礎培養(yǎng)基250克國產(chǎn)/進口
CaCO2/結(jié)腸細胞株國產(chǎn)
肝細胞HBV病毒株英文名稱:HEPG2.2.15
DNA酶甲基綠瓊脂基礎/脫氧核糖核酸酶甲基綠瓊脂基礎/Dnase Agar Base With Methyl Green用于細菌的DNA酶水解試驗100克國產(chǎn)/進口
人臍靜脈血管內(nèi)細胞英文名稱:HUVEC
薩比亞病毒PCR檢測試劑盒多少錢茯苓 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
1,3-二咖啡酰奎寧酸 英文名稱 洋薊酸;朝鮮薊酸;朝薊素;菜薊素 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: Cynarin
南五味子 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
維A酸 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
乳香 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
假荊芥屬苷 英文名稱 Nepetin-7-glucoside 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥97%
尿嘧啶 英文名稱 HPLC法含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
桑寄生 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
朝藿定C 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
10-羥基喜樹堿 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 10-Hydroxycamptothecin
片姜黃 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: