詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
羌蟲病立克次氏體PCR檢測試劑盒多少錢參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),,避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,,產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,,混勻,,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
羌蟲病立克次氏體PCR檢測試劑盒多少錢 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集,、存放及運輸:
1,、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2,、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次),;
3,、運輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
羌蟲病立克次氏體PCR檢測試劑盒多少錢15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
羊IgG1 ml國產(chǎn)
Myc標(biāo)簽蛋白裂解液20 ug20μg,、100μggersion
Sf-9(昆蟲細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Ishikawa, 人子宮內(nèi)膜細(xì)胞系
CRFK(貓腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
GES-1/胃上細(xì)胞株國產(chǎn)
小鼠胃細(xì)胞英文名稱:MFC
BEL-7402(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠垂體瘤細(xì)胞英文名稱:MMQ
蘇木素伊紅(HE)染色試劑盒規(guī)格:>200次
人胃細(xì)胞英文名稱:HSC
羌蟲病立克次氏體PCR檢測試劑盒多少錢蘆丁 英文名稱 Rutin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥95%
依那普利拉 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: HPLC系統(tǒng)適應(yīng)性檢查
曲可蘆丁 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: HPLC法含量測定用
鐵掃帚 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
毛兩面針?biāo)?英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 鑒別
▲萘磺酸右氧芬 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量:
檳榔花 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量:
利福霉素B 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 系統(tǒng)適應(yīng)性
白薇 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
尼可占替諾(煙酸占替諾) 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: UV法含量測定
雙苯酰草胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:957-51-7 250mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: