詳細介紹
反應(yīng)五要素:
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒品牌參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶,、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),,避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會,。
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒品牌使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,,加入0.1 mL 溶液B,,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR,。剩余樣品可以放4℃保存,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1,、致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒品牌樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集,;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,,-70℃以下可長期保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3,、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸,。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒品牌14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5 (IGFBP5) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
泛素結(jié)合酶E2A(UBE2A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2A (UBE2A) 規(guī)格:48T/96T 進口,、國產(chǎn)
核纖層蛋白A/C(LMNA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lamin A/C (LMNA) 規(guī)格:48T/96T 進口,、國產(chǎn)
REST輔抑制因子1(RCOR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for REST Corepressor 1 (RCOR1) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Poly ADP Ribose Polymerase 4 (PARP4) 規(guī)格:48T/96T 進口,、國產(chǎn)
耳椎蛋白90(OC90)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Otoconin 90 (OC90) 規(guī)格:48T/96T 進口,、國產(chǎn)
脫氧輔蛋白合酶(DHPS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Deoxyhypusine Synthase (DHPS) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Runt Related Transcription Factor 2 (RUNX2) 規(guī)格:48T/96T 進口,、國產(chǎn)
神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(NRP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuropilin 1 (NRP1) 規(guī)格:48T/96T 進口,、國產(chǎn)
端粒酶關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Telomerase Associated Protein 1 (TEP1) 規(guī)格:48T/96T 進口,、國產(chǎn)
胰淀素(IAPP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Islet Amyloid Polypeptide (IAPP) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
載脂蛋白H(APOH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein H (APOH) 規(guī)格:48T/96T 進口,、國產(chǎn)
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒品牌二氫辣椒堿 英文名稱 二氫辣椒素 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: Dihydrocapsaicin
濱蒿內(nèi)酯 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
20(S)-人參皂苷-RH2 英文名稱 20(S)-Ginsenoside-RH2 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
D-(-)-奎寧酸 英文名稱 D-(−)-Quinic acid 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
上一枝蒿 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
金鐵鎖 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
人參皂苷Rb2 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: Ginsenoside Rb2
奮乃靜 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
安格洛苷C 英文名稱 Angoroside C 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
曲尼司特 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
豬去氧膽酸 英文名稱 Hyodeoxycholic acid 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: UV≥98%