大鼠原代呼吸道上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：293A,，人胚腎上皮細(xì)胞系(腺病毒包裝級(jí)別) 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-C 卵巢癌細(xì)胞，HO-8910細(xì)胞 CHO/dhFr-細(xì)胞,，中國倉鼠腎細(xì)胞(二氫還原酶缺陷型) ACO2 Others Human 人 ACO2 / Aconitase 2 豬脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞培養(yǎng)基 兔原代髓核細(xì)胞培養(yǎng)基

大鼠原代呼吸道上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基

大鼠原代呼吸道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持      大鼠     原代呼吸道上皮細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含      大鼠     原代呼吸道上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于      大鼠     原代呼吸道上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

多功能肽酶2(LMP2)重組蛋白 Recombinant Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2)

CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白

CD3D重組小鼠 CD3d / CD3 delta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

TGFBR2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TGFBR2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

MZB1重組人 MZB1 / PERP1 蛋白 Protein

豬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒

People of cyclooxygenase 2 (COX-2) ELISA Kit 人環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒

Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 兔型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAP13(Humanapelin13)ELISAKit人apelin13

血清樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑盒20次

PorcineIerleukin18,IL-18ELISAKit豬白介素18(IL-18)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠心素(mouse ANP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(mouse AIF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠抗利尿激素/血管加壓素(mouse AVP/ADH)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠固(mouse ALD)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human phospho protein kinase C (P-PKC) ELISA Kit 人0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒

HumanLipoxinA4,LXA4ELISAKit 人脂氧素A4(LXA4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1試劑盒雞胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞DAPKINASE蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MousegranzymesA,Gzms-AELISAKit小鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒規(guī)格：96T/48T

雄激素受體抗體

N-α-乙酰轉(zhuǎn)移酶11抗體

大鼠原代呼吸道上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基CD3D重組小鼠 CD3d / CD3 delta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

多功能肽酶2(LMP2)重組蛋白 Recombinant Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2)

MZB1重組人 MZB1 / PERP1 蛋白 Protein

CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白

TGFBR2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TGFBR2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測(cè),。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌,、真菌等污染檢測(cè),。