兔原代背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：4179 長尾綠猴胚胎細(xì)胞 Lewis 小鼠肺癌細(xì)胞 VRK1 Others Human 人 VRK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 MAP2K1 Others Mouse 小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞; 豬原代脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)基 大鼠原代胸腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

兔原代背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞專用培養(yǎng)基

兔原代背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持兔原代背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含兔原代背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于兔原代背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的培養(yǎng)。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

Proinsulin 胰島素原 0.5mgProinsulin 胰島素原

INSL4 Protein Human 重組人 INSL4 / EPIL 蛋白

NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein

TNFRSF21 Protein Human 重組人 DR6 / TNFRSF21 蛋白

BAMBI重組人 BAMBI / NMA 蛋白 Protein

豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒

Human tuberculosis aibody IgG (TB-Ab IgG) ELISA Kit 人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)試劑盒

PorcineHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit 豬熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAlpha-EP(HumanAlpha-Endomorphin)ELISAKit人α-內(nèi)肽

血液精(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次

Phaseolusvulgarisagglinin,PHAELISAKit菜豆凝集素(PHA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人真核翻譯起始因子3a試劑盒   人真核翻譯起始因子3a試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人真核翻譯起始因子3a試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人真核翻譯起始因子3a試劑盒、人真核翻譯起始因子3a 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

人長效甲狀腺刺激素試劑盒   人長效甲狀腺刺激素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人長效甲狀腺刺激素試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人長效甲狀腺刺激素試劑盒,、人長效甲狀腺刺激素試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒   人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒,、人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

人早老素2試劑盒   人早老素2試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人早老素2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人早老素2試劑盒、人早老素2 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

豚鼠白介素5(IL5)試劑盒 ,，英文名： IL5 ELISA Kit

Human stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)試劑盒

rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforaZP(Humanai-zonapellucidaaibody,aZP)ELISAKit人抗透明帶抗體

線粒體超氧化物歧化酶(Mn/FeSOD)分離試劑盒50次

RabbitAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit兔抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

亞鐵氧化酶抗體

PE標(biāo)記人/小鼠CD45R單克隆抗體

兔原代背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞專用培養(yǎng)基NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein

Proinsulin 胰島素原 0.5mgProinsulin 胰島素原

BAMBI重組人 BAMBI / NMA 蛋白 Protein

INSL4 Protein Human 重組人 INSL4 / EPIL 蛋白

TNFRSF21 Protein Human 重組人 DR6 / TNFRSF21 蛋白

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測(cè),。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌,、真菌等污染檢測(cè),。