詳細(xì)介紹
小鼠原代少突膠質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品名稱 | 小鼠原代少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產(chǎn)品分類 | 原代細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 貨號(hào) | GOY-XP3102 |
小鼠原代少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持小鼠原代少突膠質(zhì)細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含小鼠原代少突膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于小鼠原代少突膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代少突膠質(zhì)細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項(xiàng)
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),,請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,如有接觸,,立即用自來水沖洗即可,。
儀器 | 試劑 | 耗材 |
離心機(jī) | 胎牛血清(FBS) | 離心管(15ml、50ml) |
生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
電動(dòng)移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管(2ml,、5ml,、10ml) |
CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基(含血清) | 1.8mL 凍存管 |
倒置顯微鏡 | 凍存液:90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
復(fù)蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃;
2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,,加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,,放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱;
3) 戴上護(hù)目鏡,,厚毛線手套后,從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中
復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,;
4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,,混勻后,1000rpm 離心 5min,;
5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,,寫上細(xì)胞名稱、日期,,再加入 4ml 培養(yǎng)基,;
6) 離心完成后棄去上清,用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,,轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,,混勻后轉(zhuǎn)入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。
傳代 (細(xì)胞傳代建議一傳二)
1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),,可進(jìn)行傳代,。
2) 在生物安全柜內(nèi),打開培養(yǎng)瓶瓶口,,收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基,;
3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,水平放置培養(yǎng)瓶,,使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,,吸棄 PBS;
4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml,,浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,;
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,,將懸液吸入 15ml 離心管,;
① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,;
② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和(避免吹打③),;向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,輕拍培養(yǎng)瓶,,95%左右細(xì)胞脫,。
6) 1000rpm 離心 5min;
7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,,各加入 4ml培養(yǎng)基,。
8) 離心完成后,棄上清,,用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,,將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,,每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml;
9) 水平放置培養(yǎng)瓶,,震蕩混勻后,,將培養(yǎng)瓶置于 37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
凍存 (細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支)
1)~6)參照傳代步驟
7)離心完成后,,棄上清,用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,,然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,;
8)將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,;
9)第二天,,取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。
血小板衍生生長(zhǎng)因子A(PDGFA)重組蛋白 Recombinant Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA)
CDK2 Protein Human 重組人 CDK2 / p33 蛋白
TCN2重組人 TCN2 蛋白 Protein
RSV-F Protein Respiratory syncytial virus/RSV 重組人類呼吸道合胞病毒 hRSV Fusion protein / RSV-F (Strain RSS-2) 蛋白
HA重組甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒
People gathered protein (Agrin) ELISA Kit 人聚集蛋白(Agrin)試劑盒
Porcinesodium-glucosecoanspoer1,SGLT1ELISAKit 豬-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(SGLT1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforALP(Humanalkalinephosphatase)ELISAKit人堿性0酸酶
血液卵0脂乙酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)活性比色法定量試劑盒20次
Mouseα1-microglobulin,α1-MGELISAKit小鼠α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠纖連蛋白試劑盒 小鼠纖連蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠纖連蛋白試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠纖連蛋白試劑盒,、小鼠纖連蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠胃腸癌標(biāo)志物試劑盒 小鼠胃腸癌標(biāo)志物試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠胃腸癌標(biāo)志物試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠胃腸癌標(biāo)志物試劑盒,、小鼠胃腸癌標(biāo)志物試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠lisa試劑盒 小鼠試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠試劑盒、小鼠lisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠網(wǎng)膜素試劑盒 小鼠網(wǎng)膜素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠網(wǎng)膜素試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠網(wǎng)膜素試劑盒,、小鼠網(wǎng)膜素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human phospholipase C (PLC) ELISA Kit 人0酯酶C(PLC)試劑盒
HumanorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit 人孤腓肽(OFQ/N)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenIerleukin1β,IL-1β試劑盒雞白介素1β(IL-1β)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞GSK-3BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)試劑盒規(guī)格:96T/48T
液泡蛋白分選蛋白25抗體
PE標(biāo)記小鼠CD152單克隆抗體
小鼠原代少突膠質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基TCN2重組人 TCN2 蛋白 Protein
血小板衍生生長(zhǎng)因子A(PDGFA)重組蛋白 Recombinant Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA)
HA重組甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
CDK2 Protein Human 重組人 CDK2 / p33 蛋白
RSV-F Protein Respiratory syncytial virus/RSV 重組人類呼吸道合胞病毒 hRSV Fusion protein / RSV-F (Strain RSS-2) 蛋白
?無菌操作?:細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,,使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,,定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套,,戴口罩,、手套。
?器材滅菌?:玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,,塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。
?試劑選擇?:所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,,使用前需進(jìn)行無菌檢測(cè)。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異,,應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。
?培養(yǎng)條件?:多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,,定期檢查氣體濃度與流量,細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。
?日常觀察?:每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。
?定期檢測(cè)?:定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌、真菌等污染檢測(cè),。