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詳細介紹
細胞實驗步驟：
一,、細胞復蘇
1.將10ml移液管、移液槍,、1ml槍頭,、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶,、酒精燈,、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min,；
2.預熱培養(yǎng)基,；
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；
4.將凍存細胞從液氮罐中取出,；
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化,；
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中,；
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中,；
9.1000r/min,離心5min；
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,；
11.吸棄上清液,；
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內,，補加適量培養(yǎng)基,，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,，并做好標記；
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài),；
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
商品屬性：
產品名稱 | 大鼠原代角質形成細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP3110 |
鼠原代角質形成細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經過長期測試,，本產品可保持大鼠原代角質形成細胞最佳的生長狀態(tài),。
本產品中已包含大鼠原代角質形成細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分,，可直接用于大鼠原代角質形成細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代角質細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代角質細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清（FBS） | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項：
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部,；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。
細胞培養(yǎng)步驟：
?細胞復蘇?：
從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍,。
解凍后,，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布,。
放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞換液?：
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液,。
加入PBS緩沖液,，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片,，重復幾次,。
加入新的培養(yǎng)基。
?細胞傳代?：
當細胞長到80%~90%時,，進行傳代,。
吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗,。
加入消化液,，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化,。當細胞間隙增大后,，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。
吹打細胞使其成為懸液,，轉移到離心管中離心,。
棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞,。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,，補加新鮮培養(yǎng)基。
做好標記,，放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞凍存?：
選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存,。
將細胞轉移到離心管中離心，棄上清,。
加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO）,，輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉移到冷凍保存管中,，標記后放入程序降溫盒,，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存,。
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