人原代Treg細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：AGS細(xì)胞,，胃腺癌細(xì)胞 人喉癌細(xì)胞,TU 686細(xì)胞 大鼠垂體瘤細(xì)胞;MMQ PRAP1 Others Human 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細(xì)胞裂解液 EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞 非洲綠猴腎，BS-C-1細(xì)胞 hFOB 豬小腸上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞培養(yǎng)基 人原代肝竇內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

人原代Treg細(xì)胞專用培養(yǎng)基

人原代Treg細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持人原代Treg細(xì)胞最佳的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含人原代Treg細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于人原代Treg細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí)，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

Alpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原 0.5mgAlpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原)

CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白

LYPD3重組小鼠 C4.4A / LYPD3 蛋白 Protein

ENPEP Protein Rat 重組大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (aa 41-945, His 標(biāo)簽)

NLK重組人 nemo-like kinase / NLK 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA 試劑盒

P Nixonn Ron (Prednisolone) ELISA Kit 人龍(Prednisolone)試劑盒

Human26Sproteasome,26SPSMELISAKit 人26S蛋白酶體(26SPSM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAbnormalprothrombin,APT試劑盒人異常原(APT)試劑盒規(guī)格：96T/48T

正常女性人體肝組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升

Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISAKit小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠細(xì)胞凋亡因子 (mouse Fas)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

小鼠細(xì)胞凋亡因子配體 (mouse Fas-Ligand)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

mouse Flt3 Ligand   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子 (mouse G-CSF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

小鼠B6(VB6)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat bone morphogenetic protein 6 (BMP-6) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒

HumanCCAAT/enhancerbindingproteinbeta,C/EBPβELISAKit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白β(C/EBPβ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenLipopolysaccharides,LPS試劑盒雞脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞MAPK蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199試劑盒規(guī)格：96T/48T

自然殺傷激活受體相關(guān)蛋白DAP12重組兔單克隆

補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白4抗體

人原代Treg細(xì)胞專用培養(yǎng)基EGFR重組小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

半乳糖凝集素9(GAL9)重組蛋白 Recombinant Galectin 9 (GAL9)

LYZL2重組人 Lysozyme 2 / LYZL2 蛋白 Protein

CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白

IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌,、真菌等污染檢測。