大鼠原代肺動脈平滑肌細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產品：ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人細胞裂解液 前列腺上皮細胞生長添加物PEpiCGS DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人細胞裂解液 非洲綠猴腎細胞;VERO LCC1 豬原代骨骼肌細胞培養(yǎng)基 大鼠原代下丘腦神經元細胞培養(yǎng)基

大鼠原代肺動脈平滑肌細胞專用培養(yǎng)基

大鼠原代肺動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經過長期測試，本產品可保持大鼠原代肺動脈平滑肌細胞最佳的生長狀態(tài)。

本產品中已包含大鼠原代肺動脈平滑肌細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于大鼠原代肺動脈平滑肌細胞的培養(yǎng)。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部,；這部分有害物質的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,；

2) 準備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預熱,；

3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復蘇的細胞,，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代。

2) 在生物安全柜內,，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉入液氮罐中保存。

C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一種原癌基因)抗原

IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白

IL18R1重組小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

FSTL3 Protein Mouse 重組小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白

CSF2重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein

小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA 試劑盒

Human urokinase type plasminogen activator (uPA/PLAU) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)試劑盒

HumanNuclearmaixprotein22,NMP-22ELISAKit 人核基質蛋白22(NMP-22)試劑盒 96T/48T 進口分裝

guineapigmaixmetalloproteinase9,MMP-9試劑盒豚鼠基質金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞漿可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人周期素依賴性激酶7(CDK-7)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒 ,，英文名： CCK ELISA Kit

Human dopamine D2 receptor (D2R) ELISA Kit 人多巴胺D2受體(D2R)試劑盒

Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 兔子酯轉移蛋白(CETP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-TG(RabbitBeta-Thromboglobulin)ELISAKit兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白

細菌銅ATP酶(Cu++-ATPase)活性比色法量試劑盒20次

rabbitInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組膜粘連蛋白5抗體

阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關膠原蛋白抗體

大鼠原代肺動脈平滑肌細胞專用培養(yǎng)基IL18R1重組小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一種原癌基因)抗原

CSF2重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein

IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白

FSTL3 Protein Mouse 重組小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應無菌,、無污染，使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內濕度應保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體,、細菌、真菌等污染檢測,。