人原代膽囊成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：AsPc-1細(xì)胞,，人轉(zhuǎn)移胰腺癌細(xì)胞 人正常皮膚細(xì)胞,HaCaT細(xì)胞 小鼠T淋巴細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/9 FGFR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR3 人細(xì)胞裂解液 PC-12(高分化),，PC12，大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株(高分化) 羊子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞培養(yǎng)基 豬原代頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

人原代膽囊成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

人原代膽囊成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持人原代膽囊成纖維細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含人原代膽囊成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用人原代膽囊成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml,，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

銅藍(lán)蛋白(CP)重組蛋白 Recombinant Ceruloplasmin (CP)

AGO1 Protein Human 重組人 AGO1 / Argonaute 1 / EIF2C1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MERTK重組人 MERTK / Mer 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RPN2重組人 RPN2 / Ribophorin II 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA 試劑盒

Rat ai glucoprotein 210 (gp210) ELISA Kit 大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)試劑盒

HumanCardiacmyosin-lightchains1,CMLC-1ELISAKit 人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanAmylin試劑盒人胰淀素(Amylin)試劑盒

植物蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量試劑盒20次

MonkeyInsulin,INSELISAKit猴胰島素(INS)試劑盒

植物吲哚乙酸(IAA)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

植物（ETH）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

植物血凝素/凝集素（PHA）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

植物纖維素酶(CE)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA 試劑盒

Human ai compleme 1q aibody (C1q) ELISA Kit 人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)試劑盒

Porcinegrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISAKit 豬促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforaGTELISAKit大鼠血管緊張素原

血液葡萄糖激酶(glucosekinase)比色法定量試劑盒20次

Mousei-iodothyronine,T3ELISAKit小鼠三甲狀腺原(T3)試劑盒

22號(hào)染色體開放閱讀框9抗體

蛋白酪磷酸酶非受體型20抗體

人原代膽囊成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基MERTK重組人 MERTK / Mer 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

銅藍(lán)蛋白(CP)重組蛋白 Recombinant Ceruloplasmin (CP)

RPN2重組人 RPN2 / Ribophorin II 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AGO1 Protein Human 重組人 AGO1 / Argonaute 1 / EIF2C1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測(cè),。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌,、真菌等污染檢測(cè)。