大鼠原代結(jié)腸成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞;BNL 1ME A.7R.1 人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞;THP-1 ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 SELPLG Others Mouse 小鼠 PSGL-1 / CD162 羊原代髓核細(xì)胞培養(yǎng)基 人原代子宮內(nèi)膜干細(xì)胞培養(yǎng)基

大鼠原代結(jié)腸成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

大鼠原代結(jié)腸成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持大鼠原代結(jié)腸成纖維細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代結(jié)腸成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分,，可直接用大鼠原代結(jié)腸成纖維細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml,，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

PAX8(Paired box gene 8 0.5mgPAX8(Paired box gene 8) 配對(duì)盒基因8抗原

AFM Protein Human 重組人 AFM / Afamin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

BMPR1A Protein Human 重組人 BMPRIA / ALK-3 / CD292 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

TRIB3重組人 TRIB3 / TRB3 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISA 試劑盒

Rat ai smooth muscle aibody (ASMA) ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒

HumanCailageglycoprotein39,HCgp-39ELISAKit 人軟骨糖蛋白39(HCgp-39)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1Ab試劑盒人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)試劑盒

植物谷氨酰半胱合成酶(glamylsysteinesyhetase)活性比色法定量試劑盒20次

Humanβ-glucuronidase,，βGDELISAKit人β葡萄糖酸苷酶(βGD)試劑盒

植物E試劑盒   植物E試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   植物E試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：植物E試劑盒、植物E 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒   豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒,、豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人chemerin試劑盒   人chemerin試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人chemerin試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人chemerin試劑盒,、人chemerin 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

人12羥二十烷四烯酸試劑盒   人12羥二十烷四烯酸試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人12羥二十烷四烯酸試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人12羥二十烷四烯酸試劑盒,、人12羥二十烷四烯酸試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA 試劑盒

Human ai spindle aibody (MSA) ELISA Kit 人抗紡錘體抗體(MSA)試劑盒

Porcinetissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAGEsELISAKit大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物

血液腎素(renin)熒光定量試劑盒20次

MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)試劑盒

9號(hào)染色體開放閱讀框71抗體

端粒保護(hù)蛋白1抗體

大鼠原代結(jié)腸成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基HA重組甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

PAX8(Paired box gene 8 0.5mgPAX8(Paired box gene 8) 配對(duì)盒基因8抗原

TRIB3重組人 TRIB3 / TRB3 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

AFM Protein Human 重組人 AFM / Afamin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

BMPR1A Protein Human 重組人 BMPRIA / ALK-3 / CD292 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測(cè),。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌、真菌等污染檢測(cè),。