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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-XP3157 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 僅用于科研 |
詳細(xì)介紹
人原代NaiveTcell細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基
產(chǎn)品分類(lèi) | 原代細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100mL/500mL |
貨號(hào) | GOY-XP3157 |
人原代Naive T cell細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持人原代Naive T cell細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含人原代Naive T cell細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分,，可直接用于人原代Naive T cell細(xì)胞的培養(yǎng),。
名稱(chēng) | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代T淋巴細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清（FBS） | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項(xiàng)
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來(lái)水沖洗即可,。
| 儀器 | 試劑 | 耗材 |
| 離心機(jī) | 胎牛血清（FBS） | 離心管（15ml,、50ml） |
| 生物安全柜 | 無(wú)菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
| 電動(dòng)移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無(wú)菌移液管（2ml,、5ml,、10ml） |
| CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基（含血清） | 1.8mL 凍存管 |
| 倒置顯微鏡 | 凍存液：90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
復(fù)蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；
2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；
3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中
復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；
4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；
5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫(xiě)上細(xì)胞名稱(chēng)、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；
6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。
傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）
1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代,。
2) 在生物安全柜內(nèi)，打開(kāi)培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基,；
3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無(wú)菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；
4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml,，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來(lái)則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；
① 準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；
② 將消化下來(lái)的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫,。
6) 1000rpm 離心 5min,；
7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。
8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml；
9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）
1）~6）參照傳代步驟
7）離心完成后,，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；
8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過(guò)夜降溫,；
9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。
?無(wú)菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。
?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買(mǎi)已滅菌產(chǎn)品,。
?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無(wú)菌,、無(wú)污染，使用前需進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè),。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類(lèi)型選擇合適培養(yǎng)液。
?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。
?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。
?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌,、真菌等污染檢測(cè),。
CK19 細(xì)胞角蛋白19多肽抗原 0.5mgCK19 細(xì)胞角蛋白19多肽抗原
AFP Protein Human 重組人 AFP / alpha-fetoprotein 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL25重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
MME Protein Mouse 重組小鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LMAN2重組人 LMAN2 / VIP36 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠角質(zhì)形成細(xì)胞衍生趨化因子|Murine KC (CXCL1)ELISA 試劑盒
Rat ai neuophil / cenosome aibody (ACA) ELISA Kit 大鼠抗粒/中心體抗體(ACA)試劑盒
HumancyclophilinA,CyPAELISAKit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanAicenomereAibody,ACA/CENP試劑盒人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)試劑盒
植物還原型(GSH)濃度高效液相色譜定量試劑盒50次
Humanα2-plasmininhititor,α2-PIELISAKit人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)試劑盒
植物K1(VK1)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物E(VE)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物D3(VD3)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物D2(VD2)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA 試劑盒
Human ai polymyositis scleroderma aibody (PM-Scl/PM-1) ELISA Kit 人抗多發(fā)性肌硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)試劑盒
Porcinemaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAGEs(Mouseadvancedglycationendproducts)ELISAKit小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物
血液砷元素比色法定量試劑盒20次
Mousetoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISAKit小鼠毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)試劑盒
AlkB同源蛋白7抗體
芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體
人原代NaiveTcell細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基IL25重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CK19 細(xì)胞角蛋白19多肽抗原 0.5mgCK19 細(xì)胞角蛋白19多肽抗原
LMAN2重組人 LMAN2 / VIP36 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
AFP Protein Human 重組人 AFP / alpha-fetoprotein 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MME Protein Mouse 重組小鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 (His 標(biāo)簽)
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