小鼠原代肝kupffer細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：IL17RC Others Human 人 IL17RC (aa 1-454) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細(xì)胞裂解液 CL-0413PC-3M-2B4(人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株) 兔原代主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 大鼠原代毛囊干細(xì)胞培養(yǎng)基

小鼠原代肝kupffer細(xì)胞專用培養(yǎng)基

小鼠原代肝kupffer細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持小鼠原代肝kupffer細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代肝kupffer細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分,，可直接用于小鼠原代肝kupffer細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染，使用前需進(jìn)行無菌檢測,。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌,、真菌等污染檢測,。

白細(xì)胞激活黏附因子(ALCAM)重組蛋白 Recombinant Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM)

FLRT2 Protein Human 重組人 FLRT2 蛋白

IFNA2重組小鼠 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IFNA2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白

PDGFRB重組人 PDGFRB / PDGFR-1 / CD140b 蛋白 Protein

大鼠速激肽受體1(TACR1)試劑盒 ，英文名： TACR1 ELISA Kit

Mouse dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S) ELISA Kit 小鼠脫氫表雄酮酯(DHEA-S)試劑盒

ratProstaglandinE1,PG-E1Elisakit 大鼠前列腺素E1(PGE1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHIS(HumanHistamine)ELISAKIT人組胺

細(xì)胞ROS激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitColⅢ大鼠Ⅲ型膠原

豚鼠免疫球蛋白A試劑盒   豚鼠免疫球蛋白A試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠免疫球蛋白A試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠免疫球蛋白A試劑盒,、豚鼠免疫球蛋白Aeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

豚鼠卵清蛋白特異性IgG試劑盒   豚鼠卵清蛋白特異性IgG試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠卵清蛋白特異性IgG試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：豚鼠卵清蛋白特異性IgG試劑盒、豚鼠卵清蛋白特異性IgGeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

豚鼠卵清蛋白特異性IgE試劑盒   豚鼠卵清蛋白特異性IgE試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠卵清蛋白特異性IgE試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：豚鼠卵清蛋白特異性IgE試劑盒,、豚鼠卵清蛋白特異性IgEeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒   豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽試劑盒,、豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human carbonic anhydrase 2 (CA-2) ELISA Kit 人酶2(CA-2)試劑盒

HumanoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit 人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2試劑盒人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物中性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(neualinvease)活性比色法定量試劑盒(胞質(zhì))20次

Humaenascin-R,TN-RELISAKit人肌腱蛋白R(TN-R)試劑盒規(guī)格：96T/48T

應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1重組兔單克隆抗體

Ras激酶抑制因子連接增強(qiáng)蛋白3抗體

小鼠原代肝kupffer細(xì)胞專用培養(yǎng)基GPA33重組小鼠 GPA33 / Glycoprotein A33 蛋白 Protein

Annexin Ⅲ peptide 膜粘連蛋白A3抗體 0.5mgAnnexin Ⅲ peptide 膜粘連蛋白A3抗體

KDR重組人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

FLRT2 Protein Human 重組人 FLRT2 蛋白

C Protein Rat 重組大鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白