大鼠原代腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：IFNAR2 Others Human 人 IFNAR2 / IFNABR 人細(xì)胞裂解液 MDBK細(xì)胞，牛腎細(xì)胞 人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,RKO-AS45-1細(xì)胞 CM-H109人破骨細(xì)胞培養(yǎng)基NAALADL1 Others Human 人 NAALADL1 人細(xì)胞裂解液 兔原代子宮內(nèi)膜干細(xì)胞培養(yǎng)基 小鼠原代脾源性內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)基

大鼠原代腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基

大鼠原代腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持大鼠原代腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于大鼠原代腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測(cè)。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌、真菌等污染檢測(cè),。

ADAMTS7 peptide 整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原 0.5mgADAMTS7 peptide 整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標(biāo)簽)

FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated Protein

EPCAM Protein Rat 重組大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

WWP2重組人 WWP2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

大鼠胎球蛋白B(FETUB)試劑盒 ,，英文名： FETUB ELISA Kit

Mouse glucocoicoid receptor beta (GR- beta) ELISA Kit 小鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)試劑盒

RatCalcitonin,CTELISAKit 大鼠降鈣素(CT)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHLA-A(HumanleukocyteaigenA)ELISAKit人類白細(xì)胞抗原A

細(xì)胞PKG-Iβ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitBF大鼠B因子

小鼠25羥基D3(25(OH)D3/25HVD3)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

小鼠肝細(xì)胞生長因子受體(HGFR/ c-MET)試劑盒

Human varicella zoster virus IgG (VZV-IgG) ELISA Kit 人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)試劑盒

HumanAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit 人抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanai-ophoblastaibody,ATA試劑盒人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體(ATA)試劑盒

植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)比色法定量試劑盒(超氧陰離子)20次

Humanansferfactor，TFELISAKit人轉(zhuǎn)移因子(TF)試劑盒

煙堿型乙酰受體A2(神經(jīng)型)抗體

PE-Cy5標(biāo)記小鼠Ly-6A/E單克隆抗體

大鼠原代腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基MAPK1重組小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)重組蛋白 Recombinant Corticotropin Releasing Hormone (CRH)

GUCA1A重組人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標(biāo)簽)

TNFRSF14 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 蛋白