詳細(xì)介紹
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產(chǎn)品名稱 | 非剪切式勻漿機(jī)1臺(tái)圖片 |
規(guī)格 | 100mL |
價(jià)格 | 電詢 |
公司非剪切式勻漿機(jī)1臺(tái)圖片的RNA/DNA提取目錄有下面10個(gè)系列,5000余種產(chǎn)品:點(diǎn)擊了解更RNA純化,。
1,、RNA純化系列產(chǎn)品
2、DNA純化系列產(chǎn)品
3,、電泳及回收系列產(chǎn)品
4,、探針標(biāo)記及檢測(cè)系列產(chǎn)品
5、核酸擴(kuò)增系列產(chǎn)品
6,、克隆表達(dá)系列產(chǎn)品
7,、基因組研究系列產(chǎn)品
8、蛋白質(zhì)研究系列產(chǎn)品
9,、細(xì)胞生物學(xué)研究系列產(chǎn)品
10,、即用型溶液、質(zhì)粒庫(kù)、菌種庫(kù)等等
非剪切式勻漿機(jī)1臺(tái)圖片的詳細(xì)介紹:
非剪切式勻漿機(jī)1臺(tái)圖片DNA提取流程圖:
問(wèn):常用的DNA 濃度及純度檢測(cè)方法有哪些,?
稱答:非剪切式勻漿機(jī)1臺(tái)圖片回收得到的DNA 可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度,。瓊脂糖凝膠電泳通過(guò)對(duì)比定量的Marker 來(lái)定量濃度;紫外分光檢測(cè)OD260/280 比值,,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說(shuō)明所得 DNA 純度較好,,如果洗脫時(shí)不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會(huì)偏低,,因?yàn)閜H 值和離子存在會(huì)影響光吸收值,,但不表示純度低。
問(wèn):長(zhǎng)段回收時(shí)應(yīng)注意哪些問(wèn)題,?
答:當(dāng)DNA段長(zhǎng)度較長(zhǎng)(5 kb 以上)時(shí),,回收效率會(huì)有所下降,這是DNA 切膠回收時(shí)的常見(jiàn)現(xiàn)象,。此時(shí)建議按以下方法解決問(wèn)題:
1 適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點(diǎn)樣量,;
2 由于長(zhǎng)段DNA 不易從樹(shù)脂上洗脫下來(lái),建議洗脫兩次,,可以提高洗脫效率,;
3 減少操作過(guò)程中對(duì)長(zhǎng)段DNA 的物理?yè)p傷,如混合振蕩操作不要過(guò)于劇烈,,切膠時(shí)不要將DNA 長(zhǎng)時(shí)間暴露在紫外等下,。
非剪切式勻漿機(jī)1臺(tái)圖片注意事項(xiàng):
●溶液PE *次使用前請(qǐng)按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無(wú)水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無(wú)水乙醇,,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無(wú)水乙醇,,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對(duì)電泳使用的Agarose 種類沒(méi)有嚴(yán)格限制,,可以使用普通Agarose ,。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,,但沒(méi)有必要一定要使用低熔點(diǎn)的Agarose 等,。
● 電泳時(shí)請(qǐng)使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果,。
● 請(qǐng)適當(dāng)延長(zhǎng)電泳時(shí)間,,在條帶分離清晰后進(jìn)行切膠回收,以免回收到多余雜帶,。
● 為提高DNA 回收收率,,切膠時(shí)應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強(qiáng),。但如果DNA 濃度小,,或DNA 初始量少,,回收率將會(huì)偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,,其收集的DNA 段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,,不會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。
● 為了保證回收效率,,請(qǐng)不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請(qǐng)嚴(yán)格按照操作步驟操作,。2-氯苯甲酸甲酯 610-96-8
2'-羥基苯丙酮 610-99-1
2,4-二溴苯甲酸 611-00-7
鄰氯氯芐 611-19-8
4-氯喹啉 611-35-8
異丁酰苯 611-70-1
苯甲酰甲酸 611-73-4
順式-1,2-二羥甲基乙烯 6117-80-2
巴豆醇 6117-91-5
1-苯基-1-環(huán)丙羧酸 6120-95-2
鄰苯二甲醇 612-14-6
2-硝基芐氯 612-23-7
2-硝基苯甲腈 612-24-8
6-氯喹啉 612-57-7
3-甲基喹啉 612-58-8
7-甲基喹啉 612-60-2
4-(氨基磺?;?苯硼酸 613660-87-0
3-乙酰苯腈 6136-68-1
2-氨基苯乙酮 613-89-8
苯甲酰腈 613-90-1
4-氯丁醛縮二乙醇 6139-83-9
2-氯喹唑啉 6141-13-5
煙酸乙酯 614-18-6BLN3 小腦肽3抗體
CDKL5 周期素依賴性激酶樣5抗體
Alpha chimerin α1-chimaerin蛋白抗體
CSN7b 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白9復(fù)合體7b抗體
Calcipressin 1/DSCR 1 鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白1抗體
Calcipressin 3 鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白3抗體
Centaurin alpha 1 Centaurin α1抗體
Ctip1 B淋巴細(xì)胞白血病/淋巴瘤11/鋅指蛋白856抗體
Ctip2 B淋巴細(xì)胞白血病/淋巴瘤11B抗體
CALHM1 鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1抗體
CLACP 阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關(guān)膠原蛋白抗體
CLSTN1 老年癡呆相關(guān)類鈣粘蛋白CS1抗體
CIAS1 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體
capsid protein 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型衣殼蛋白抗體
Cullin 5 血管加壓素激活鈣啟動(dòng)受體蛋白1抗體
c-Kit 干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/細(xì)胞表面分化抗原抗體抗體
非剪切式勻漿機(jī)1臺(tái)圖片CLIC6 氯離子通道蛋白6抗體
Cecropin B 殺菌肽B/天蠶抗菌肽B抗體
CA13 碳酸酐酶13抗體
操作步驟:
1 非剪切式勻漿機(jī)1臺(tái)圖片切取含有目的DNA段的瓊脂糖凝膠條帶。
● 盡量切除不含有目的DNA 部分的凝膠,,減少凝膠體積,,提高DNA 回收率。
● 切膠時(shí),,請(qǐng)使用長(zhǎng)波長(zhǎng)UV (360 nm )光盒,。且不要將DNA 長(zhǎng)時(shí)間暴露在紫外燈下,以防DNA 損傷,。
2 稱取凝膠的重量近似地確定其體積,。
● 凝膠重量的稱量方法:取1.5 ml 離心管電子天平稱初質(zhì)量,切膠裝在離心管后稱終質(zhì)量,,兩者差即為膠的質(zhì)量,。不同離心管的重量可能有差異,因此,,每個(gè)離心管的重量需單獨(dú)稱量,。
3 按照每100 mg 瓊脂糖凝膠對(duì)應(yīng)100 µl 溶液BD 的比例,向離心管中加入溶液BD,。
4 50 ℃水浴7-10min,,直至凝膠*溶化。期間需要振蕩混合3 次,。
● 瓊脂糖必須*融化,,以免堵塞柱子,嚴(yán)重影響DN段的回收效率,。
● 如果總體積大于500 µl,,可適當(dāng)增加溶膠時(shí)間。
● 若此時(shí)溶液變紅,,可加10 µl 3M NaAC (pH 5.2),。
5 將步驟4 所獲溶液置于DNA 純化柱中,靜置2min ,。
● 膠塊*溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱,,因?yàn)榧兓谳^高溫度時(shí)結(jié)合DNA 的能力較弱,。
6 12,000 rpm 離心1min。若溶液量大于DNA 純化柱的容積,,可分兩次離心,,棄濾液。
● 此時(shí)DNA 片段被吸附于DNA 純化柱中的硅膠膜上,。
7 加入500 µl 溶液BD,。12,000 rpm, 離心1min,棄濾液
8 加入500 µl 溶液PE,。12,000 rpm, 離心1min,,棄濾液。
● 溶液PE 初次使用前用無(wú)水乙醇按1: 4 稀釋,,即含80% 乙醇,。
● 此步驟的作用是將硅膠膜上吸附的蛋白、鹽等雜質(zhì)洗脫,,以獲得高質(zhì)量DNA 片段,。
9 加入500 µl 溶液PE。12,000 rpm, 離心1min,,棄濾液,。
10 12,000 rpm 離心 3min ,以*去除純化柱中的液體,。
● 此步驟的作用是去除殘留乙醇,,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時(shí)也利于DNA 片段的充分溶解,。
11 將離心柱置于新的1.5 ml 離心管中,。向純化柱的中央處,懸空滴加30-100 µl 溶液Eluent (60℃預(yù)熱),,靜置2min ,。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DNA 片段,。貯存于-20℃,。
● 溶液Eluent 可用無(wú)菌雙蒸水代替,但其pH 需為8.0-8.5,,加入體積視DNA 目的片段的多少,、用戶對(duì)目的片段濃度要求而定。
● 對(duì)溶液Eluent 60℃預(yù)熱,,會(huì)提高提取DNA 目的片段的產(chǎn)量,。