豚鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：IL23R Others Cynomolgus 食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 人細(xì)胞裂解液 超氧化物歧化酶分析試劑盒SOD 腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1 HeLa 人細(xì)胞 raw264.7 兔原代脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)基 人原代星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基

豚鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

豚鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持豚鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含豚鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分,，可直接用豚鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來(lái)水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí)，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無(wú)菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來(lái)則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來(lái)的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

?無(wú)菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無(wú)菌,、無(wú)污染，使用前需進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè),。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌、真菌等污染檢測(cè),。

PGRN (progranulin 0.5mgPGRN (progranulin) 顆粒蛋白前體抗原

CKM Protein Human 重組人 CKM / CK-MM 蛋白

M1重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

CEACAM1 Protein Human 重組人 CEACAM1 / CD66a 蛋白

ALDH7A1重組人 ALDH7A1 / ATQ1 蛋白 Protein

大鼠雙調(diào)蛋白(AREG)試劑盒 ,，英文名： AREG ELISA Kit

Mouse vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 小鼠B6(VB6)試劑盒

RatAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 大鼠血管生成素2(ANG-2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforh-FABP(Humanheafattyacidbindingprotein)ELISAKit人心型脂肪酸結(jié)合蛋白

細(xì)胞SRCN2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKit17-OHCS大鼠17羥皮質(zhì)類固醇

小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human rotavirus (RV) ELISA Kit 人輪狀病毒(RV)試劑盒

HumanOrexieceptor,OXRELISAKit 人食欲素受體(OXR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Dolichosbifowsagglinin,DBA試劑盒雙花扁豆凝集素(DBA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseE-Cadherin,E-CadELISAKit小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)試劑盒規(guī)格：96T/48T

造血轉(zhuǎn)錄因子PU.1抗體

SEC63域內(nèi)含蛋白1抗體

豚鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基M1重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

PGRN (progranulin 0.5mgPGRN (progranulin) 顆粒蛋白前體抗原

ALDH7A1重組人 ALDH7A1 / ATQ1 蛋白 Protein

CKM Protein Human 重組人 CKM / CK-MM 蛋白

CEACAM1 Protein Human 重組人 CEACAM1 / CD66a 蛋白