人原代肉芽成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人細(xì)胞裂解液 CD1D & B2M Others Human 人 CD1D & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 CL-0057CCL-149(大鼠肺泡上皮細(xì)胞) 雜交瘤(B類) 兔原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 兔原代嗅鞘細(xì)胞培養(yǎng)基

人原代肉芽成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

人原代肉芽成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持人原代肉芽成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含人原代肉芽成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分,，可直接用人原代肉芽成纖維細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時，可進行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

M2-PK ( pyruvate Kinase M2 0.5mgM2-PK ( pyruvate Kinase M2) 酸激酶-M2(抗原)

CKB Protein Human 重組人 CKB / Creatine kinase B type 蛋白

CXCL9重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白 Protein

FCGRT & B2M Protein Mouse 重組小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標(biāo)簽) Protein

大鼠瘦素受體(LEPR)試劑盒 ,，英文名： LEPR ELISA Kit

Mouse vitamin C (VC) ELISA Kit 小鼠C(VC)試劑盒

RatFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit 大鼠FMS樣酪激酶3配體(Flt3L)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHEV-IgM(HumanHepatitisDvirusIgM)ELISAKit人戊型肝病毒IgM

細(xì)胞SYK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKit1,3-βDglu大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶

小鼠水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒   96T/48T

小鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒   96T/48T

小鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒   96T/48T

小鼠水通道蛋白0(AQP-0)試劑盒   96T/48T

小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat myoglobin (MYO/MB) ELISA Kit 大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)試劑盒

Humanglycophosphatidylinositol,GPIELISAKit 人糖0脂酰肌醇(GPI)試劑盒 96T/48T 進口分裝

differeiation40ligand,sCD40L試劑盒兔子可溶性CD40配體(sCD40L)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞線粒體復(fù)合物I蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseEmbryonicStemMESPU30,M30ELISAKit小鼠胚胎干細(xì)胞系MESPU30(M30)試劑盒規(guī)格：96T/48T

粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤轉(zhuǎn)運蛋白1抗體

SHISA7蛋白抗體

人原代肉芽成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基CXCL9重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白 Protein

M2-PK ( pyruvate Kinase M2 0.5mgM2-PK ( pyruvate Kinase M2) 酸激酶-M2(抗原)

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標(biāo)簽) Protein

CKB Protein Human 重組人 CKB / Creatine kinase B type 蛋白

FCGRT & B2M Protein Mouse 重組小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染，使用前需進行無菌檢測,。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進行支原體,、細(xì)菌、真菌等污染檢測,。