詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1,、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,,100 U/L,50 U/L,,25 U/L,,12.5 U/L,6.25 U/L,,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,其余濃度以此類推,。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml。
4,、 檢測稀釋液A:1×10ml,。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml,。
一管式病毒DNA提取試劑盒原理是由一對引物介導(dǎo),,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
?、僖锱c模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則;
?、跿aq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
一管式病毒DNA提取試劑盒 | 50次 | GOY-P4012 |
使用方法:
注:所有試劑使用前需*解凍,,混合均勻,,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1.樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,,具體提取方法請參照相關(guān)說明書,;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用,。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液,、RT-PCR酶所需總量,,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶,。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物,、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū),。
特點 :
本試劑盒可用于檢測食品或其他材料中是否有的成分。現(xiàn)代食品加工工藝改變了食材原有的味道,、氣味,、色澤、紋理和質(zhì)地等特性,,因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無法對食材的真?zhèn)芜M(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定,。同時部分食材還有致敏性,因此基于基因檢測的快速靈敏的食材來源檢測技術(shù)將對食品監(jiān)管和安全提供重要的保障,。本產(chǎn)品就是為滿足這一需求根據(jù) PCR 原理開發(fā)的產(chǎn)品,,它具有下列特點:
1. 一管式操作,用戶只需要提供樣品即可,。
2. 根據(jù)大豆熱休克蛋白基因保守區(qū)域設(shè)計引物,,能專一性檢測出樣品中的大豆成分,但不能檢測其他非大豆成分,。
3. 快速,,整個檢測過程(按一個樣品計)所需時間僅為 2.0 小時,。
4. 只需要普通 PCR 儀和凝膠電泳儀,無需配置貴重儀器設(shè)備,。
5. 對混合樣品中大豆成分的檢測下限為 0.1%,,對樣品中大豆成分的核酸檢測下限為 1.0ng/μL。
6. 本只能用于科研,,足夠 50 次 40uL 體系的常規(guī) PCR,。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶,、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度,。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增,。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右,。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),,特別是3'端的互補(bǔ),,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)*個堿基,,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會,。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,,重現(xiàn)性為100%,。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,,可實現(xiàn)對其的直接檢測,,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時,。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性,。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
Rabbit choline O-acetyltransferase,CHAT ELISA kit大鼠visfatin elisa檢測試劑盒Denudanolide A
Rabbit superoxide dismutase 1,soluble(SOD1)ELISA kit大鼠VK1 elisa檢測試劑盒Fargesone B
Rabbit Superoxide dismutase [Mn],mitochondrial(SOD2)ELISA kit大鼠VLDL elisa檢測試劑盒Sanshodiol
Rabbit hs-CRP ELISA Kit大鼠VMA elisa檢測試劑盒Piperenone
Rabbit forkhead box protein P3,FOXP3 ELISA kit大鼠VWF elisa檢測試劑盒Mirandin B
Rabbit complement fragment 5a,C5a ELISA Kit大鼠vWF-cp elisa檢測試劑盒1,6-Dihydro-4,7'-epoxy-1-methoxy- 3',4'-methylenedioxy-6-oxo-3,8'-lignan
Rabbit Complement 3,C3 ELISA Kit大鼠XOD elisa檢測試劑盒Wallichinine
Rabbit Malondialdehyde,MDA ELISA Kit大鼠Zn-MT elisa檢測試劑盒Kadsurenin D
Rabbit Cystatin C,Cys-C ELISA Kit大鼠ZO1 elisa檢測試劑盒Denudadione C
Rabbit interleukin-7,IL7 ELISA kit大鼠α Actin elisa檢測試劑盒Isokadsurenin D
Rabbit Interleukin 5 ELISA Kit大鼠α1-AGP elisa檢測試劑盒Dihydrosesamin
Rabbit Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit大鼠α1-MG elisa檢測試劑盒4-O-Demethylkadsurenin D
Rabbit Albumin ELISA Kit大鼠α2-MG elisa檢測試劑盒5-Allyl-3-methoxy-6-methyl-7-(3,4,5-tri methoxyphenyl)bicyclo[3.2.1]oct-3-ene-2,8-dione
Rabbit adramycin,ADR ELISA Kit大鼠α-enolase elisa檢測試劑盒Hancinone C
Rabbit gamma-glutamyltransferase 1,GGT1 ELISA kit大鼠α-GST elisa檢測試劑盒Hedyotisol B
Rabbit beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit大鼠α-SMA elisa檢測試劑盒2,3-Di(3',4'-methylenedioxybenzyl) -2-buten-4-olide
一管式病毒DNA提取試劑盒Stat4 (Tyr693) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體規(guī)格 0.1ml
STAT3 (Tyr705) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體規(guī)格 0.1ml
STAT3 (Ser727) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體規(guī)格 0.1ml
Stat2 (Tyr690) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體規(guī)格 0.1ml
STAT1 (Tyr701) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體規(guī)格 0.1ml
STAT1 (Ser727) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體規(guī)格 0.1ml
SRF (Ser77) 磷酸化生長激素釋放因子抗體(血清應(yīng)答因子)規(guī)格 0.1ml