IM-9 (外周血B淋巴細(xì)胞)的相關(guān)*：細(xì)胞APC蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒 10/50 次
細(xì)胞APC蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒 10/50 次
APC蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
APC蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次
APC蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒 25次
細(xì)胞CDK2蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒 10/20次

冷凍保存細(xì)胞之方法,？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。

產(chǎn)品屬性：   

商品介紹：

 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；

3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二,、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；

6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

 NOS1AP 基因全長ORF克隆

 KLC3 基因全長ORF克隆

 RFTN2 基因全長ORF克隆

 FNDC7 基因全長ORF克隆

 PRPF31 基因全長ORF克隆

 CYP2A7 基因全長ORF克隆

 ATG14 基因全長ORF克隆

 FGB 基因全長ORF克隆

 ALDH8A1 基因全長ORF克隆

 GABRR1 基因全長ORF克隆

IM-9 (外周血B淋巴細(xì)胞)2 ug pRevTR pRevTR 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

變形桿菌成套生化鑒定管（BXWS） BXWS 13種*1套/盒*10盒

2 ug pcDNA3.1（+）/RFP pcDNA3.1（+）/RFP 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存

100次 植物種屬鑒定PCR Mix 4（質(zhì)體 matK） Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

100g 麥芽浸膏 Malt Extract 室溫陰涼干燥保存

50T 難辨梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒   低溫運(yùn)輸,，-20℃保存

5mL 滋養(yǎng)層細(xì)胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存