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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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—— 銷(xiāo)售熱線(xiàn) ——
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-22 14:40:02瀏覽次數(shù)：415
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1231 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 外周血單核細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1231 |
商品介紹：
名稱(chēng) 外周血單核細(xì)胞 2.組織來(lái)源：外周血 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 人外周血單核細(xì)胞分離自外周血,；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱(chēng)為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念,。單核細(xì)胞起源于骨髓中的造血干細(xì)胞,，并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進(jìn)入血液時(shí)仍然是尚未成熟的細(xì)胞,。與其他血細(xì)胞比較,，單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強(qiáng)的吞噬作用,。單核細(xì)胞在血液中停留2-3天后遷移到周?chē)M織中,，細(xì)胞體積繼續(xù)增大,，直徑可達(dá)50-80μm，細(xì)胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線(xiàn)粒體的數(shù)目也增多,，成為成熟的細(xì)胞,。固定在組織中的單核細(xì)胞稱(chēng)為組織巨噬細(xì)胞，它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié),、肺泡壁,、骨髓、肝和脾等器官,。激活了的單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞能生成并釋放多種細(xì)胞毒,、干擾素和白細(xì)胞介素，參與機(jī)體防衛(wèi)機(jī)制,，還產(chǎn)生一些能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)的因子,。在炎癥周?chē)鷨魏思?xì)胞能進(jìn)行細(xì)胞分裂，并包圍異物,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血單核細(xì)胞采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血單核細(xì)胞經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H182 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性半貼壁半懸浮 細(xì)胞形態(tài)圓形、巨噬細(xì)胞樣 傳代特性不增殖,；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 COLEC10 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 DLL1 / Delta-like 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 IL1RL1 / ST2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 ANTXR2 / CMG2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 AMICA1 / JAML 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
外周血單核細(xì)胞4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框28抗體Human SLC25A4(ADP/ATP translocase 1) ELISA Kit纖維素透析袋
陽(yáng)離子通道相關(guān)蛋白2抗體Human PLEKHO1(Pleckstrin homology domain-containing family O member 1) ELISA Kit硬酯酸甲酯
陽(yáng)離子通道相關(guān)蛋白3抗體Human GALC(Galactocerebrosidase) ELISA Kit趨化蛋白2（NAP-2/CXCL7）ELISA試劑盒,
液泡蛋白分選蛋白VPS13A抗體Human FAM214A(Protein FAM214A) ELISA Kit人β內(nèi)啡肽（β-EP）ELISA試劑盒,β-EP ELISA kit
鈣調(diào)B相關(guān)蛋白2抗體Human SERPINB13(Serpin B13) ELISA Kit人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（sTfR）ELISA試劑盒,sTfR ELISA kit
CHRAC1蛋白抗體Human PTGDR(Prostaglandin D2 receptor) ELISA Kit人腺病抗原（ADV-Ag）ELISA試劑盒,ADV-Ag ELISA
ATP依賴(lài)的解螺旋抗體Human ABCA7(ATP-binding cassette sub-family A member 7) ELISA Kit人抗呼吸道合胞病抗體（RSV）ELISA試劑盒,RSV ELISA
X染色體開(kāi)放閱讀框6抗體Human TCF3(Transcription factor E2-alpha) ELISA Kit人瘢痕性天皰瘡抗體（CP）ELISA試劑盒,CP ELISA
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