MET-5A（間皮細(xì)胞)的相關(guān)*：遠(yuǎn)西方雜交（FAR WESTERN BLOT） 印跡同位素檢測(cè)試劑盒 5次
印跡覆膜結(jié)合（BLOT OVERLAY BINDING）同位素檢測(cè)試劑盒 5次
遠(yuǎn)西方雜交（FAR WESTERN BLOT） 印跡消除 20次
試劑盒
蛋白質(zhì)西方雜交10倍印跡膜轉(zhuǎn)移緩沖液 500毫升
蛋白質(zhì)西方雜交10倍清理緩沖液 500毫升

產(chǎn)品屬性： 

商品介紹：

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；

6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

 IKB alpha / NFKBIA 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 NR3C1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 CYP3A4 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 GSTM2 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 MLH1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 COMT 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 FGG 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 GBA 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 HEXA 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 PTGS2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

MET-5A（間皮細(xì)胞)15.6-1000 U/L 人胞外超氧化物歧化(SOD3)ELISA試劑盒

7.8-500 pg/mL. 人周期素依賴性激2C(CDKN2C)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Mitochondrial uncoupling protein 2

液體菌種保存管（副溶）（不含瓷珠） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：1.4ml*50支

0.39-25 ng/mL ELISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 9

15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Calponin-2

15.6-1000 pg/mL 人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒

12.5-800 ng/mL 人富組蛋白(HTN-3)ELISA試劑盒

0.78-50 ng/mL 人T-細(xì)胞表面糖蛋白CD4(T-cell surface glycoprotein CD4) ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human UDP-glucuronosyltransferase 1-1