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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-13 09:09:18瀏覽次數(shù)：352
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0733 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 兔肺泡巨噬細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0733 |
商品介紹：
名稱 兔肺泡巨噬細(xì)胞 2.組織來(lái)源：肺組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 兔肺泡巨噬細(xì)胞分離自肺組織,；肺是機(jī)體的呼吸器官,，位于胸腔，左右各一,，覆蓋于心之上,。肺有分葉，左二右三,，共五葉,。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉,、鼻相連,，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅,。肺泡由單層上皮細(xì)胞構(gòu)成的半球狀囊泡,。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無(wú)數(shù)細(xì)支氣管，它們的末端膨大成囊,，囊的四周有很多突出的小囊泡,，即為肺泡。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,，有多種功能,，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象,。巨噬細(xì)胞較易獲得,，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化,。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng),，難以長(zhǎng)期生存,。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細(xì)胞,，而單核細(xì)胞又來(lái)源于骨髓中的前體細(xì)胞,。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫),。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對(duì)病原體作出反應(yīng),。肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬,、免疫和分泌作用都十分活躍,，有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬細(xì)胞儲(chǔ)存器官,，為結(jié)核病的研究提供了重要的材料,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺泡巨噬細(xì)胞采用機(jī)械研磨結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺泡巨噬細(xì)胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-Rb011 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)巨噬細(xì)胞樣 傳代特性屬于終末分化細(xì)胞,；屬于不增殖細(xì)胞群 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
CD38 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ApoE 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PRSS1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PLAU / UPA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
INHBB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PRSS2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TGF-beta 1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ZBTB16 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CSNK1D 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MAP3K8 基因全長(zhǎng)ORF克隆
兔肺泡巨噬細(xì)胞15.6-1000 pg/mL 人胃調(diào)理蛋白(GT)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Heat shock cognate 71 kDa protein
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human C-X-C motif chemokine 6
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Coagulation factor XI
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H4
0.156-10 ng/mL 人Wnt-10a蛋白(WNT10A)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human D(1A) dopamine receptor
B12測(cè)定用培養(yǎng)基 英文名稱：Vitamin B12 Assay Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL 人氨肽O(AP-O)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Galectin-9
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